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正文:
根尖壓片制備染色體樣品
1.根據(jù)不同材料的根尖大小,從1—3個根上切下根尖。
2.將根尖放在Vectabond處理過的載玻片上,去掉根冠。
3.對于小根尖,加10μL45%乙酸,用“擠壓針”擠壓根尖,
直到釋放出分生組織
細(xì)胞。對于大根尖,可縱向剖開,用一個小解剖刀將分生組織
刮到10-20吐
45%乙酸中。然后象上面那樣擠壓分生組織。
4.用皮下注射針或尖頭鑷子除去碎片(不要讓細(xì)胞干燥)。
5.用皮下注射針頭攪拌細(xì)胞懸液,并用45%乙酸調(diào)整體積至1
0—15社。
6.將準(zhǔn)備好的蓋玻片蓋在細(xì)胞懸液上。
7.用濾紙條吸掉多余液體。
8.迅速地將載玻片在火焰上過1—2次。不要過熱——載玻片
不應(yīng)熱到拿不住
的程度。
9.在蓋玻片上放上濾紙,輕輕擠壓。
Ⅱ0.用相差顯微鏡觀察細(xì)胞,重復(fù)步驟8-9,直至細(xì)胞分散度
合適。
11.記下分散良好的中期細(xì)胞的坐標(biāo),并用金剛鉆筆在蓋玻片
上標(biāo)記位置。
12.將載玻片浸入液氮中(用夾鉗)速凍,或者蓋玻片向上在干
冰塊上放置至少5
min。
13.用解剖刀快速掀掉蓋玻片,立即將載玻片浸入96%乙醇中
,至少5s。
14.在空氣中干燥。將載玻片放人裝有一袋硅膠的密封的塑料
玻片盒中,—20
℃保存。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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