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正文:
微
生物數(shù)目生長也可以用直接
顯微鏡計數(shù)
直接顯微計數(shù)法
細菌生長也可以用直接顯微計數(shù)法(direct micro—scopic co
unts)測定。該法首先將一定體積的
微生物培養(yǎng)液加到經(jīng)特殊校準
的蝕刻載玻片上,即Petroff-Hausser計數(shù)板。用一支校準的移液
管將細菌懸浮液加到計數(shù)室內。細菌沉淀且液體流動緩慢后,對特
定校準區(qū)域內的微生物進行計數(shù)。單位體積初始菌懸液中微生物的
數(shù)目可由一個合適公式計算。每毫升培養(yǎng)液中的細菌數(shù)目可以以合
理的準確度估測。直接顯微計數(shù)法的準確度是建立在每毫升培養(yǎng)液
所含細菌數(shù)目大于一千萬個。這是因為只有當大量細胞存在時計數(shù)
槽的計數(shù)結果才可能準確。當然,還需要細菌是均勻散布在培養(yǎng)液
中。該技術的缺點是一般無法分辨死細胞和活細胞。
最大可能數(shù)法
一些樣品所含微生物數(shù)目太少,若采用標準平板計數(shù)法則無法
測得準確的結果。如在食品和水衛(wèi)生檢查或當微生物不能在瓊脂上
生長時,可采用最大可能數(shù)法(most probable number,MPN)。技
術人員通過觀察樣品,估計樣品中的細胞數(shù),制備成一系列稀釋系
數(shù)逐漸加大的稀釋液。稀釋系數(shù)增大時,就會出現(xiàn)某些試管中只含
有一個菌體而其他管中沒有菌體的狀況。典型的MPN測定是對一個
稀釋度取3個體積(10mL,1mL,0.1mL),每種體積做5支試管(圖6
.10)。經(jīng)過培養(yǎng),僅有一個菌體的試管會產生氣泡和或變混濁等
生長現(xiàn)象。查對最大可能數(shù)表可以獲得原培養(yǎng)液中菌體濃度的估計
值。該表的數(shù)值是根據(jù)統(tǒng)計概率得出的,表示原培養(yǎng)液中菌體數(shù)有
95%的可能性落在特定區(qū)間內。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科