標(biāo)題：標(biāo)本在光學(xué)顯微鏡下觀察橫斷面和縱斷面切片
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2018-1-31 0:17:11
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正文:
制備標(biāo)本在光學(xué)顯微鏡下觀察橫斷面和縱斷面切片
標(biāo)本制備
所有的組織學(xué)、組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)研究都可以在冰凍標(biāo)本上
進(jìn)行。固定和石蠟包埋會(huì)破壞纖維的結(jié)構(gòu)，用這些標(biāo)本不可能進(jìn)行酶和
代謝研究。一些免疫組織化學(xué)染色可以用儲(chǔ)存的石蠟包埋材料做，這取
決于抗體的性質(zhì)，但進(jìn)行全套的系列研究非常困難。在光學(xué)顯微鏡下，
橫斷面比縱斷面能提供更多的信息。
理想的標(biāo)本處理應(yīng)在取材后盡快冷凍，尤其是計(jì)劃要做生物化學(xué)研
究時(shí)，但單純形態(tài)學(xué)研究可以用從異地運(yùn)輸來的標(biāo)本，必要時(shí)用輕輕沾
濕的紗布包起來，防止干燥，但延誤不要超過幾個(gè)小時(shí)。外地運(yùn)輸來的
標(biāo)本因?yàn)樽冃缘拇嬖诙绊懮锘瘜W(xué)檢查，任何形式的商業(yè)化運(yùn)輸方法
都一樣。從尸體解剖材料可以獲得一些有意義的信息，但酶組織化學(xué)染
色幾乎不能做。一些蛋白的免疫組織化學(xué)染色如肌球蛋白和層粘連
蛋白可以在死后的解剖標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)，但是肌營養(yǎng)不良素和胞漿膜蛋白在
尸體解剖材料不能被檢出，主要取決于標(biāo)本從患者死亡到冷凍的時(shí)問長
短。
將標(biāo)本直接浸入液氮中會(huì)產(chǎn)生氣態(tài)氮包裹在標(biāo)本周圍，從而延緩標(biāo)
本冷凍的過程。更快冷凍過程和更好的保存組織結(jié)構(gòu)的方法是放人在液
氮中預(yù)冷至一160 9C的異戊烷中進(jìn)行冷凍。先將異戊烷裝在容器內(nèi)，而
后浸人液氮中，直至完全成為固態(tài)，而后復(fù)溫到固態(tài)和液態(tài)并存的溫度
點(diǎn)。
我們通常在標(biāo)有標(biāo)本名稱的軟塞上進(jìn)行標(biāo)本固定，這樣標(biāo)本容易從
恒冷切片機(jī)的夾頭上取下并易于保存。標(biāo)本放在軟塞上，在標(biāo)本的基底
部周圍放上OCT固定劑。然后，將帶標(biāo)本的軟塞放進(jìn)處于液態(tài)的異戊烷
中。降溫時(shí)間長短必須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，部分依賴于標(biāo)本的大小，通常10～20
秒就夠了。時(shí)間太短，會(huì)引起肌纖維內(nèi)形成冰晶的假象，而時(shí)間過長易
導(dǎo)致標(biāo)本碎裂。冷凍的組織塊在準(zhǔn)備切片以前儲(chǔ)存在一40℃或更低的溫
度條件下。長期儲(chǔ)存標(biāo)本最好放在液氮內(nèi)，避免停電造成損失。切片前
，軟塞用OCT凍在切片機(jī)的標(biāo)本托上。切片后，
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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