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但超高解析度顯微鏡究竟是不是也會遭遇到失焦的障礙？衍射現(xiàn)像的發(fā)生是當(dāng)我們在做顯微觀察時，通常將焦點放在單一點（或分子）上，這個焦點的位置是定位在觀察物反射光的中心位置；但當(dāng)我們要觀察的目標(biāo)出現(xiàn)多個反射光點時，此時兩個以上的光點將會出現(xiàn)重疊現(xiàn)象使得我們無法找到觀察目標(biāo)的真正位置。也就是研究員要有辦法隨時開關(guān)各個觀察分子的亮光。要達到這項目標(biāo)，研究員則須利用基因改造方式將觀察細胞內(nèi)引入螢光蛋白體，而兩條雷射射線原則上可以只讓某幾個研究員想要觀察的分子同時發(fā)亮，也因此，這些螢光細胞便成為顯微鏡下的觀察影像焦點，當(dāng)研究員以這個方式觀察一部分的細胞表面組織后，他們將必須反覆重複同樣的步驟，直到全部觀察完所有的表面組織為止。反之，如果細胞沒有經(jīng)過螢光基因改造的話，科學(xué)家將無法研究細胞表面的分子結(jié)構(gòu)，也不能在須臾間掌握分子的運動軌跡，而且經(jīng)過基因改造后的螢光分子僅能維持不到一秒的發(fā)光時間。

現(xiàn)在，分子無線光學(xué)研究中心與神經(jīng)突觸細胞生理學(xué)實驗室的生物學(xué)家（隸屬于國家科學(xué)研究院與波爾多大學(xué)的研究室）發(fā)明了一種新的技術(shù)來讓細胞分子「發(fā)亮」，這個原理便是使用即時免疫性染劑（immuno-marquage en temps reel），受測的活體細胞被放在一種具有螢光抗體的溶液中（這種溶液有在市面上販?zhǔn)�，所用的抗體要依觀察目標(biāo)而作改變），使得螢光抗體融入細胞中，不過研究員不需要讓所有細胞都染上這樣的抗體，而是將螢光染劑注入到顯微鏡中，在觀察的過程中，一部分的抗體會自動與欲觀察的分子進行聯(lián)結(jié)進而使其發(fā)光，隨后，當(dāng)這部分的螢光消失后，其他部分的分子則會在逐步的觀察中自動地接受到顯微鏡內(nèi)存的螢光染劑而逐一發(fā)光。

這項技術(shù)得以讓研究人員紀(jì)錄數(shù)以千計的單一細胞分子之運動軌跡，并且可以奈米層級觀察這樣的動態(tài)現(xiàn)象，國家科學(xué)研究中心與波爾多大學(xué)的研究員也向世人展示了這項技術(shù)具有高度效率以及可在各種不同的細胞系統(tǒng)（異質(zhì)細胞、突狀纖維細胞或我們一般所說的神經(jīng)細胞）內(nèi)觀察內(nèi)膜組織中的各種分子。這項技術(shù)不僅使用簡單、用途廣、并且十分可靠，從今以后一般大眾就算沒有傳統(tǒng)的光學(xué)顯微設(shè)備也可以進行細部的細胞分子觀察。更特別的是，我們甚至也可以以每秒50奈米的解析度拍攝諸如神經(jīng)元等單一細胞的活動變化（相當(dāng)于一般攝影中每秒20個畫面）。波爾多大學(xué)的研究學(xué)者已經(jīng)開始以此觀察活體神經(jīng)突觸內(nèi)神經(jīng)接受器的動態(tài)結(jié)構(gòu)。相信有其他許多研究團隊也會陸陸續(xù)續(xù)採用這項技術(shù)，屆時可以預(yù)期生物界將會颳起一陣研究觀察的革命。