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正文:
用
顯微鏡(油鏡)觀察并計(jì)數(shù)算微
生物或菌落的數(shù)量
滾動(dòng)試管計(jì)數(shù)法
該方法將會(huì)用到帶有螺旋蓋的試管及型號(hào)不同的瓶子。試管中事先加
入一定量的融化、接種的瓊脂,使其凝固在容器底部形成薄層;適溫培養(yǎng)
,通過旋轉(zhuǎn)試管進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。滾動(dòng)試管計(jì)數(shù)法被認(rèn)為是計(jì)數(shù)嚴(yán)格厭養(yǎng)微
生物最好方法,參閱Anderson和Fung[31關(guān)于這種方法的綜述。顯微鏡直接
計(jì)數(shù)法(DMC)
這是最簡(jiǎn)單的方法,DMC法由以下幾部分組成:將食物樣品涂片或在顯
微鏡的載玻片上培養(yǎng),用適當(dāng)?shù)娜旧珓┤旧,用顯微鏡(油鏡)觀察并計(jì)數(shù)
。DMC法廣泛應(yīng)用于乳品廠,用來(lái)估測(cè)生牛奶和其他奶制品的
微生物學(xué)質(zhì)量
,這種特殊方法最初是由R.S.Breed發(fā)明的(Breed計(jì)數(shù))。這種方法包括
:在顯微鏡載玻片上1 cm2范圍內(nèi)涂布0.01 mL樣品,經(jīng)過對(duì)樣品進(jìn)行固定
、脫脂、染色,則可計(jì)算微生物或菌落的數(shù)量,在這個(gè)過程中還包括校正
顯微鏡。這種方法還可用于其他食品,如干燥食品和冷凍食品的微生物快
速檢測(cè)。
DMC法的優(yōu)點(diǎn)包括:快速,簡(jiǎn)便,可以觀察細(xì)胞形態(tài),而且有助于提高
熒光探測(cè)器的效率。其缺點(diǎn)是:由于這是一種顯微鏡方法,因此容易造成
操作人員疲勞,無(wú)論活細(xì)胞還是死細(xì)胞都會(huì)被計(jì)入在內(nèi),食品顆粒通常不
能與微生物區(qū)別開,單細(xì)胞和菌落無(wú)法清楚地區(qū)分,有些細(xì)胞由于染色不
好而可能不被計(jì)入,因此DMC法總是比SPC法的菌數(shù)多。盡管存在上述缺點(diǎn)
,DMC法仍是檢測(cè)食品中微生物數(shù)量最快的方法。
已經(jīng)發(fā)明了一種對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)并計(jì)數(shù)的方法口1]。這種方法使用
四唑鹽,(對(duì)一碘苯基一3一對(duì)一硝基苯基)一5-苯基氯化唑(聲一iodopheny
l一3一戶一nitrophenyl)一5一phenyl tetrazolium chloride(INT)。將細(xì)
胞置于過濾消毒后的INT溶液中,37%條件下水浴10 min,然后用0.45/z
m的膜過濾。然后將膜在50%條件下干燥10 min,將這種特制的膜放人棉籽
油中浸泡,蓋上蓋玻片后進(jìn)行觀察,這種方法可用于細(xì)菌和酵母菌的純培
養(yǎng),但用牛奶進(jìn)行對(duì)照時(shí),測(cè)得的值比APC法低1~1.5 logs。利用熒光顯
微鏡和活性蘭(viablue)(修飾過的苯胺藍(lán)熒光染料)
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北京顯微鏡百科
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