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正文:
很多研究者的結(jié)果證明,當(dāng)對(duì)儀器的反應(yīng)曲線作適當(dāng)?shù)男拚龝r(shí),
光度計(jì)法
測(cè)量的是細(xì)胞群體量,而不是細(xì)胞數(shù)目。只有當(dāng)所有細(xì)胞的
大小相同時(shí),例如衰老培養(yǎng)物中的細(xì)胞(或者生長(zhǎng)在有某些抗生素存在
的培養(yǎng)基內(nèi)),光度計(jì)法才能準(zhǔn)確測(cè)出細(xì)胞數(shù)目。大細(xì)胞與小細(xì)胞相比
,能散射更多的光線。當(dāng)解釋根據(jù)光度計(jì)法淤得的曲線時(shí),必須永遠(yuǎn)
記住細(xì)胞大小對(duì)用光度計(jì)法測(cè)得的表觀濃度的影響。
由細(xì)胞大小不同引起的固有偏差使劑量—反應(yīng)曲線產(chǎn)生一些誤差
,但是在測(cè)定抗生素時(shí),并不引起實(shí)際上的困難。如果細(xì)胞群體的密
度受測(cè)定因素用完的限制而不受短時(shí)間生長(zhǎng)的限制,那么,測(cè)定維生
素和氨基酸所獲鉛的生長(zhǎng)曲線,并不產(chǎn)生由細(xì)胞大小引起的誤差。
空氣氣泡和振蕩誤差
為了使細(xì)菌完全懸浮,通常必須劇烈進(jìn)行振蕩,結(jié)果在細(xì)菌懸浮
液中形成空氣氣泡并懸浮于其中。這些氣泡嚴(yán)重地干擾混濁度的準(zhǔn)確
振蕩試管會(huì)引起三種類(lèi)型的誤差。如果試管不劇烈振蕩,以便使
積聚在試管壁上的細(xì)菌分散開(kāi)來(lái),結(jié)果會(huì)產(chǎn)生第一種誤差。當(dāng)用金黃
色葡萄球菌作為測(cè)定菌時(shí),測(cè)得的混濁度大約低logb。當(dāng)試管在劇烈
振蕩后立即測(cè)量時(shí),就會(huì)由劇烈振蕩過(guò)的試管中的空氣氣泡產(chǎn)生第二
種也是更大的一種誤差。劇烈振蕩過(guò)的試管放置一段時(shí)間,直到空氣
氣泡升起為止。這時(shí),由于試管中細(xì)菌的沉降,引起了第三種也是最
小的一種誤差。如果將試管在振蕩后放置約15分鐘,然后再進(jìn)行測(cè)量
,所有誤差都很小。酵母沉降非常迅速,在測(cè)定混濁度以前,必須重
新懸。
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