標(biāo)題：在顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù)菌類分析便攜顯微鏡
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2020-6-4 0:35:13
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正文:
在顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù)菌類分析便攜顯微鏡
在血球計(jì)數(shù)板上放好特制蓋玻片,換一支無(wú)菌管吸取稀釋液少許,
從血球計(jì)數(shù)板的槽中緩緩注入,使菌液自行充滿平臺(tái)Ⅱ和蓋玻片之間,
多余菌液讓其從槽中流出,不得讓蓋玻片有絲毫被菌液頂浮的現(xiàn)象,否
則,擴(kuò)大容積,影響計(jì)算結(jié)果。注入液的稀釋度選擇,即以小格內(nèi)分布的
菌數(shù)清晰可數(shù)為宜,如選108,小格的菌數(shù)過(guò)多,應(yīng)選稀釋度更高的,反之
應(yīng)選較低的。一般選每小格內(nèi)含有5-10個(gè)菌為宜。
注入菌液后靜置幾分鐘,使細(xì)菌不流動(dòng)、則可開(kāi)始在顯微鏡下觀察
和計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)取四角和中央每一小格,共5格。在每大格中選定四
個(gè)方格計(jì)數(shù)。所選的小格在大格中的位置應(yīng)對(duì)稱,以免造成人為的誤差
。這樣共計(jì)數(shù)20個(gè)小格,為使計(jì)數(shù)結(jié)果精確,也可多數(shù)幾個(gè)小格,不過(guò)所
取的小格應(yīng)分布均勻,計(jì)數(shù)時(shí)要不斷地上下調(diào)動(dòng)細(xì)動(dòng)螺旋,以便看到懸
浮在小室菌液內(nèi)不同深度的菌細(xì)胞。凡落在小格的
計(jì)菌器計(jì)數(shù)
所謂 Petroff- Hauser或計(jì)菌器,基本上是一種改良的血球計(jì)。其
小方格的高度較低,僅有0.02毫米深的淺槽,菌體經(jīng)染色后在普通顯微
鏡下直接作業(yè)。也可不必染色在暗視野顯微鏡下計(jì)算。對(duì)于含菌數(shù)多
的水樣可不必加以沖稀,就可注入計(jì)數(shù)器內(nèi)計(jì)算。這樣就比上法簡(jiǎn)便快
速。但要區(qū)別出活死菌和非菌顆粒跟上法一樣仍是很困難的,不適用于
含細(xì)菌少的樣品的計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)步驟如下:
(1)以無(wú)菌巴斯德( Pasteur)移液管吸取水樣于蓋玻片上,涂成薄片
狀,后置于 Petroff-- Hauser計(jì)菌器上,千萬(wàn)勿使此菌液流到水樣計(jì)數(shù)
框外面或滲出蓋玻片邊緣;
2)把 Petroff- Hauser計(jì)數(shù)器放在暗視野顯微鏡
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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