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正文:
缺陷型的孢子一般不能萌發(fā),若萌發(fā),也不能長成菌絲。因此可設(shè)計
如下驗步驟
①取經(jīng)過誘變處理的狍子懸液,懸浮于基本培養(yǎng)液中,振蕩后培養(yǎng)若干
小時。
②當(dāng)非缺陷型孢子在培養(yǎng)液中長出菌絲時,可用適當(dāng)?shù)倪^濾器(如用數(shù)
層紗布濾紙或玻璃絲等制成濾器)濾去菌絲,使不能萌發(fā)的孢子流入濾
液。這樣缺陷型的孢子就得到濃縮。
③再將濾液振蕩培養(yǎng)后濾去菌絲。為避免萌發(fā)的野生型孢子分泌營養(yǎng)
物于濃縮培養(yǎng)液中,必須將濃縮培養(yǎng)液離心,棄上清液,換新鮮的基本培
養(yǎng)液,反復(fù)兩次。補充新鮮培養(yǎng)液到原體積。每次培養(yǎng)時間不宜過長,
這樣才能收到滿意的濃縮效果。
④將經(jīng)離心洗滌的菌液稀釋,希望每個培養(yǎng)基平板上長出50個左右菌
落,故稀釋度應(yīng)視濃縮液中的孢子濃度大小而定
⑤各取0.1毫升稀釋液先涂抹于基本培養(yǎng)基平板上,而后涂于完全培養(yǎng)
基平板上。
⑥置平板培養(yǎng)基于適溫下培養(yǎng)至長出明顯的菌落。此法不能濃編微量
因子缺陷型或在基本培養(yǎng)基中容易死亡的各種變異菌株
差別殺菌法
此法適用于長芽孢的
微生物。由于在基本培養(yǎng)液中野生型的芽孢能
萌發(fā)形成營養(yǎng)體,在較高的溫度下被殺死,而缺陷型的芽孢卻不能萌發(fā),
故不被殺死,可由以下實驗方法濃縮在完全培養(yǎng)基中能長芽孢的缺陷型
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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