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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2011-11-30 17:02:34
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正文:
直接計(jì)數(shù)法
原理:
總菌數(shù)測(cè)定是計(jì)算微生物的直接方法,可分為直接計(jì)數(shù)及間接計(jì)數(shù)二類。其中直接計(jì)數(shù)
是利用不同的計(jì)數(shù)器或載玻片(有界線或一般載玻片)在顯微鏡下直接觀察,計(jì)算微生物細(xì)
胞的總數(shù)量。此方法優(yōu)點(diǎn)為方便、快速、節(jié)省時(shí)間;缺點(diǎn)是無(wú)法辨識(shí)是否為微生物或只是玻
片上看不清楚的黑影,部分微生物未能沉降或?yàn)樗劳鰻顟B(tài),以肉眼觀察計(jì)數(shù)的誤差極大。直
接計(jì)數(shù)的目的為計(jì)數(shù)并非觀察,所以只需能辨別出菌體即可。
以下介紹直接計(jì)數(shù)的三種方法:
(1) 血球計(jì)數(shù)法:
血球計(jì)數(shù)器為直接計(jì)數(shù)法中最常用的方法,計(jì)數(shù)器上凹槽有一邊長(zhǎng)
1mm的正方形格子接著以顯微鏡觀察計(jì)算小方格內(nèi)菌體數(shù)量,即可求得單位體積樣品之總菌(個(gè) 或 個(gè) 3 )mlcm 。數(shù)
(2) 有界線載玻片:
有界線載玻片是在載玻片的表面上刻有間隔 1mm 的平行線,其實(shí)驗(yàn)首先以
滴管吸取 0.05ml 的待測(cè)水樣,滴于載玻片上并蓋上蓋玻片。接著計(jì)算(共
進(jìn)行2 ~ 5次)在顯微鏡上放大100倍時(shí),沿線條出現(xiàn)每種微生物的個(gè)
數(shù)。若有群體出現(xiàn)的微生物,每個(gè)相連的群體當(dāng)成一個(gè)個(gè)體計(jì)算。
(3) 一般載玻片:
廢(污)水處理場(chǎng)或污染現(xiàn)場(chǎng)(on-site)其設(shè)備及操作條件較實(shí)
驗(yàn)室差,不一定能以上述方法進(jìn)行計(jì)數(shù),有時(shí)為了快速地推估微生物數(shù)量,
可利用簡(jiǎn)略方法,即于光學(xué)顯微鏡放置一般載玻片進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。唯進(jìn)行
時(shí),應(yīng)將佈滿整個(gè)蓋玻片的微生物全部計(jì)數(shù),并重復(fù)2~3次。此法因載玻
片上無(wú)格線或標(biāo)示,很容易計(jì)算錯(cuò)誤。
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