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正文:

顯微鏡照相拍黑白片的注意事項
底片對色彩的敏感度與底片對顏色波長的反應有關：
☆對藍色敏感的感光相紙，對藍光和紫外線敏感，它無法使用于一般的照相；但有時用于制作透明片。
☆Orthochromatic感光相紙對綠光敏感，常用來翻拍。
☆彩色感光相紙對所有的可見光敏感，顯微鏡照相時常使用這種感光相紙。
大致上能拍得到細節(jié)和快速的底片是和其銀粒子的大小有關，拍攝靜止的東西，適當?shù)牡灼瑢⒔o予令人滿意的結(jié)果。底片的速度以ASA值表示，依算數(shù)的方式，數(shù)值越高，底片的速度就越快，曝光的時間就越短。ASA 200的底片速率是ASA 100的2倍。
對底片而言，曝光和顯影時間中都有一些范圍可以互補。底片有高、中、低的反差，大致而言，顯示高反差的物景應該用低反差或中反差的底片照相，低反差的物景則要求使用高反差的底片。通常，高反差底片提供較少的曝光范圍，而低反差底片則提供最大的范圍。
照相時的反差可以選用濾光片加以修正，使用透射光時，使用與標本顏色互補顏色的濾光片可以得到最大的對比；假若標本染色較深，選擇使用的濾光片需與標本的顏色相近以強化構造的細節(jié)。
照相用的的底片和紙被覆蓋上一層由在明膠中加入鹵化銀粒子的懸浮體所組成的感光乳劑（通常是溴化銀）。明膠可使粒子固定在同一個地方，明膠通常不純且它的化學結(jié)構影響底片的特性。早期發(fā)現(xiàn)，動物在被喂食芥菜時所產(chǎn)生的凝膠制造出較被喂食其它食物所產(chǎn)生的凝膠敏感的底片，其中重要的成份是芥菜中特別含有的硫化合物�，F(xiàn)在在制作底片時均填加定量的硫化物以控制感光敏感度及穩(wěn)定底片之質(zhì)量。影像的形成端賴于鹵化銀結(jié)晶的純度，這些結(jié)晶常含有亞硫化物及銀離子，這個亞硫化物即通常所知的感光粒子。當粒子接受曝光時，有些電子被激化而被感光粒子暫時收容，銀離子于是移到此部區(qū)來中和粒子上的電價，這些聚集的銀粒子就稱為潛在性影像。
顯影的過程就是將這些被活化的鹵化銀結(jié)晶還原成金屬的銀粒子使成為可見的影像。顯影液通常由四個部份組成：顯影劑通常由對苯二酚構成，保護劑（NaSO2）用來預防顯影劑氧化，催化劑（alkali）用來促進催化潛在性影像的顯影作用，而抑制劑（KBr）用來降低顯影劑中未被活化的鹵化銀結(jié)晶的作用。顯影時間必需加以控制，因為顯影劑依時間的長短可同時還原經(jīng)活化與未經(jīng)活化的結(jié)晶。顯影作用藉由將材料放置于弱酸溶液中停止，即稱之為停止液。
為了使影像固定永存，未曝光的，未還原的鹵化銀必須從底片或相紙上移除。完成這樣的過程稱之為固定“fixer”。硫代硫酸鈉是最常用的定影劑。硫代硫酸鹽離子可以和鹵化銀反應產(chǎn)生可溶的銀鹽，將其由明膠上洗去。定影劑中亦常含有可以使膠質(zhì)變硬的成分。專有名詞“hypo（硫代硫酸鈉）”常常用在定影的試劑中，在定影過程中最早認為是硫代硫酸鹽中的次亞硫酸鈉在進行定影反應。在此步驟中時間因素同樣很重要，因為硫代硫酸鹽離子也可以和金屬銀作用而使影像褪色。經(jīng)過固定液后這些物質(zhì)都需清洗以移去硫代硫酸鹽，這個過程需要較長的時間，但是對于底片或相紙的影像能否長期保存非常重要。最后所需沖洗之時間可以利用“hypo clearing agent”或是hypo eliminator”做前處理而將時間縮短。
（From Thompson, 1996. P.1330-1331; Life Library of Photography-The Print）
底片的種類與特性
◎Blue sensitive film→對藍光敏感的膠卷
◎orthochromatic film→天然色膠卷
◎panchromatic film→全色膠卷
◎resolution/speed→解相力/膠卷的速度和銀粒子的大小有關
◎stationary object靜物及放大照片→用細微的粒子可得滿意的效果
◎film speed膠卷感光速度→底片感光度ASA/DIN
ASA值較高的底片感光速度較快，ASA 100的曝光時間需要ASA 200的
2倍。
◎底片的曝光時間對顯影時間（感光寬容度）有互補之效應
◎反差有高/中/低之分→高反差-曝光寬容度較小，反之亦然
◎濾光鏡的使用使反差改變→filter complimentary to specimen color
以濾光片修正反差時，標本顏色與相對應濾光片之選擇
標本色         相對應的濾鏡顏色
藍色...........................................................................紅色
藍綠色.......................................................................紅色
綠色...........................................................................紅色
紅色...........................................................................綠色
黃色...........................................................................藍色
棕色...........................................................................藍色
紫色...........................................................................綠色
苯氨紅（藍－紅）....................................................綠色
紫蘿蘭色..................................................................黃色
（From Eastman Kodak Company, 1970. Photography through the microscope）
◎底片和相紙/涂布乳膠狀的AgBr感光乳劑
1. 明膠用以固定結(jié)晶之位置
2. 經(jīng)喂食含芥末植物的動物，可以使它的油滴中含有更敏感的硫化物，可使制作之底片感光較敏感
3. 現(xiàn)在在制作底片時均控制硫化物之含量以控制相同感光度
◎結(jié)晶/硫化物/銀離子
（感光粒）  e-
   Ag＋    e-     Ag
顯影
        活性化的Ag+Br-   還原    Ag  
           影像
顯影劑  ：含對苯二酚
防腐劑：NaSO2－預防顯影劑氧化
催化劑：（alkali）催化潛在性影像上的顯影作用
抑制劑：Kbr－減緩顯影劑作用的速度，以保護未活化的AgBr
                   活化的AgBr
控制時間 顯影劑   
                   未活化的AgBr
停止劑  －弱酸，3％醋酸

    
硫代硫酸鈉＋AgBr
       
      1. 從膠片中沖去銀鹽
      2. 硬化凝膠（sodium hyposulfate）
   移除硫代硫酸鹽（sodium hyposulfate）“hypo clearing agent”