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正文:
真菌的培養(yǎng)與細(xì)菌方法與
顯微鏡觀測步驟
真菌的培養(yǎng)與細(xì)菌有所不同,一般使用 Sabouraud agar 以取代營養(yǎng)培養(yǎng)基
(nutrient agar),主要加入高濃度的糖及抗生素,以抑制細(xì)菌之污染。真菌中,酵
母菌所形成之菌落與細(xì)菌類似,但霉菌則由菌絲集合成菌絲體(mycelium),外型
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呈現(xiàn)棉絮狀,所以,可利用以下步驟進(jìn)行培養(yǎng)及顯微鏡觀察。
(一)真菌之培養(yǎng)
1. 酵母之培養(yǎng):
(1)取市售之酵母素粉少許,加入 5 mL 之 5%糖水,于 25℃培養(yǎng)箱培
養(yǎng),隔天顯微鏡觀察其生長情形。
(2)以接種環(huán)沾取酵母培養(yǎng)液,接種至 Sabouraud agar 上,置于 25℃
培養(yǎng)箱,隔天顯微鏡觀察菌落之形成。
2. 霉菌的培養(yǎng)-玻片培養(yǎng)法:
(1)取一培養(yǎng)皿,內(nèi)放 1 張濾紙,加入少許水使濾紙潮濕,上置 U 形
彎曲之波棒或牙籤,如圖 10-1 所示。玻棒上置一玻片,蓋上蓋子,
以高溫高壓滅菌。
(2)將白蠟少許加熱溶解,滴于玻片之中央,沿蓋玻片大小,其中只
有三邊之處涂上溶蠟,冷卻后使蠟?zāi)獭?br />
(3)蓋玻片浸泡于 95%酒精中,以鑷子取出,過火使酒精燃完,趁熱
將蓋玻片附于蠟上,如此形成 1 個三面封閉一面開啟的小空間。
(4)取 1 及 2 滴溶解之 Sabouraud agar,加于此小空間內(nèi),靜置使其固
化。
(5)以接種針挑取少許青霉菌及黃麴菌之孢子,沾于 Sabouraud agar
上,將培養(yǎng)皿蓋好。
(6)置于 25℃培養(yǎng)箱內(nèi),約 3 至 7 天后,顯微鏡觀察菌絲體之形成。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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