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正文:

顯微鏡下檢查細(xì)胞中鉀離子的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)方法：
以生長(zhǎng)良好的玉米或豆之葉片作為試材。以Sodium cobaltinitrite作為鉀之染劑用以定位鉀離子之存在。染劑成份及配置如下：
Na3[ CO（ NO2）6] 6.88克；9.5毫升的水，1.25毫升的冰醋酸。制備好的染劑僅能保存一至兩天（使用前和使用期間都必需保持低溫），和鉀離子產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)后會(huì)生成黃色沈淀物，而在硫化銨（ammonium sulfide）的影響下，沈淀物會(huì)變成黑色，這個(gè)作用可以幫助分辨長(zhǎng)條型表皮細(xì)胞中鉀離子累積的位置。
加入足夠蓋住兩個(gè)9公分培養(yǎng)皿底部的蒸餾水。從玉米或豆子葉片下表皮撕下表皮。自其上方切取6個(gè)或更多的長(zhǎng)條型表皮細(xì)胞，并將這些表皮細(xì)胞移到一個(gè)培養(yǎng)皿中用嘴對(duì)其吹氣一段時(shí)間，置入暗處使氣孔關(guān)閉。再將此6個(gè)長(zhǎng)條型的表皮細(xì)胞放在第二個(gè)培養(yǎng)皿之前，需先放置一個(gè)內(nèi)裝有幾毫升2 M KOH的表玻璃或淺盤(pán)以吸收二氧化碳，將長(zhǎng)條型的表皮細(xì)胞放入表玻璃或四周充滿蒸餾水中的培養(yǎng)皿中，蓋上蓋子，再將裝滿冰水之培養(yǎng)皿置于其上以隔熱。在這些長(zhǎng)條型的表皮細(xì)胞上方放一個(gè)很亮的燈泡（75-100 W），氣孔就會(huì)在30分鐘內(nèi)很明顯的張開(kāi)。
當(dāng)這些葉子進(jìn)行以上的處理時(shí)，就需準(zhǔn)備染劑，建議使用小培養(yǎng)皿和小盆子，并將下列的溶液分別放在盤(pán)子中：
（1）20 mM冰冷的CaCl2（用來(lái)從細(xì)胞壁上去除帶正電的鉀離子），
（2）冰冷的sodium cobaltinitrite染劑；
（3）蒸餾水；
（4） 5％的(NH4)2S
（注意：
(NH4)2是揮發(fā)性的且具有刺鼻的氣味，故平時(shí)應(yīng)將其存放于抽氣柜中，要使用時(shí)再倒一些出來(lái)，將（1）、（2）、（3）溶液放于裝有碎冰的小盆中。
經(jīng)過(guò)以上這兩種使長(zhǎng)條型表皮細(xì)胞氣孔打開(kāi)和關(guān)閉的處理之后，需在顯微鏡下檢查光照后表皮細(xì)胞的氣孔開(kāi)度，操作時(shí)應(yīng)避免對(duì)材料呼氣。假如經(jīng)光照后的氣孔大部分都是打開(kāi)的，而在暗處的氣孔都是關(guān)的，此時(shí)便可開(kāi)始染色。用鑷子由亮處理組的表皮撕片中選取2片，將其放入冰冷的CaCl2溶液2分鐘，然后很快的將其放入冷水中清洗，再置入染劑中染3分鐘，而此染色過(guò)程會(huì)導(dǎo)致所有的氣孔關(guān)閉。將材料拿到冷水中清洗15-30秒鐘，此動(dòng)作的目的是要將多余的染劑去除，然后放入5％的硫化銨中一分鐘，然后用水洗去黑色物質(zhì)，把它們放在顯微鏡的載玻片上并加水，蓋上蓋玻片，在高倍率和低倍率下觀察氣孔。將暗處理的表皮細(xì)胞重復(fù)上述的實(shí)驗(yàn)步驟。
仔細(xì)比較經(jīng)光處理后氣孔打開(kāi)的葉片上被染色的保衛(wèi)細(xì)胞和副細(xì)胞的大小。相對(duì)的，再比較經(jīng)暗處理后此兩種細(xì)胞。畫(huà)出氣孔、保衛(wèi)細(xì)胞和副細(xì)胞，用鉛筆標(biāo)示出鉀離子所在的位置。
問(wèn)題：
1. 是否有證據(jù)顯示在氣孔打開(kāi)前或打開(kāi)時(shí)，是鉀離子累積在保衛(wèi)細(xì)胞而不是鈉、鎂、鈣？
2. 從你的結(jié)果中是否可推測(cè)出保衛(wèi)細(xì)胞累積的鉀離子之來(lái)源？

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科