標(biāo)題：動物組織培養(yǎng)倒置式生物顯微鏡查看細胞狀況
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2011-12-15 23:45:55
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正文:
在做白血球染色體時已大致介紹過：
1.MEM動物組織培養(yǎng)液的配製：依廠商說明之濃度, 將可高溫高壓消毒的MEM加入應(yīng)有總量90﹪的dH2O, 然后高溫高壓消毒, 待冷卻后加入10﹪牛血清, 及最終濃度2×10-3mM的L-glutamine. (若係維持液, 牛血清量可酌減).
2.Animal cell lines可向新竹食科所採購.
3.CO2培養(yǎng)箱內(nèi)底層應(yīng)加水內(nèi)置少量CuSO4防霉, 保濕.
4.經(jīng)常以倒置式生物顯微鏡查看細胞狀況.
5.當(dāng)細胞擁擠, 吸除培養(yǎng)液, 以生理食鹽水洗細胞2次, (以25cm2培養(yǎng)皿言)加入1ml的0.25﹪trypsin-EDTA液, 使勻佈15sec, 吸除, 再等1min, 加入2ml培養(yǎng)液將細胞溶入, 然后吸除2/3, 保留1/3, 再加入4.3ml培養(yǎng)液, 即可.
6.對動物細胞的保存, 可將細胞以trypsin-EDTA液取出, 離心3,000rpm, 5min, 倒去上清, 以適量生理食鹽水洗細胞1次(離心洗), 將細胞以最終濃度2×107/ml溶于含8﹪DMSO的培養(yǎng)液中,保存于小型膠管中,置4℃, 1hr, 0℃, 1hr, -20℃, 1hr, 再置-70℃, 保存.
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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