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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2011-12-26 0:32:19
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正文:
顯微鏡下細(xì)胞存活率計(jì)算方法
細(xì)胞存活率計(jì)算:
(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>
利用血球計(jì)數(shù)器及細(xì)胞染料(例如 Trypan Blue),細(xì)胞染料會(huì)滲入死細(xì)胞中呈深藍(lán)色,再計(jì)算出活的細(xì)胞數(shù)量,作為結(jié)果統(tǒng)計(jì)。
(2)實(shí)驗(yàn)材料:
細(xì)胞懸浮液,顯微鏡,微量吸管,微量離心管,血球計(jì)數(shù)器,Trypan Blue。
(3)實(shí)驗(yàn)步驟:
1.依細(xì)胞繼代培養(yǎng)方式收集細(xì)胞,取得細(xì)胞懸浮液。
2.用酒精消毒計(jì)算細(xì)胞數(shù)用具。
3.取50ul細(xì)胞液與50ul Trypan Blue平均溷合。
4.取少許細(xì)胞溷合液加入血球計(jì)數(shù)器,并利用顯微鏡計(jì)算細(xì)胞數(shù)。
*活細(xì)胞不受染色,死細(xì)胞會(huì)被染色。
5.計(jì)算大九宮格之4大格子總細(xì)胞數(shù)(如圖2),再除于4,再乘于稀釋倍數(shù),再乘于104,即是每ml中細(xì)胞數(shù)數(shù)目。
*每ml細(xì)胞數(shù)=總計(jì)算細(xì)胞數(shù)/4*稀釋倍數(shù)*104
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