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作者:YIYI發(fā)布
時(shí)間:2012-3-11 23:52:09
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正文:
細(xì)菌培養(yǎng)觀察用顯微鏡專賣!上海光學(xué)儀器廠北京分部
菌株與質(zhì)體 (Strains and Plasmids)
本研究使用了三種菌,分別為枯草桿菌 (B.subtilis)、大腸桿菌 (E.coli)以及金
黃色葡萄球菌 (S.aureus)。本實(shí)驗(yàn)使用的枯草桿菌 (B.subtilis)菌株為野生型
PY79 的衍生?莶輻U菌是革蘭氏陽性菌,在顯微鏡底下觀察呈現(xiàn)桿狀;金黃
色葡萄球菌為 MRSA 菌株,亦為革蘭氏陽性菌,喜歡群聚生長(zhǎng),細(xì)胞型態(tài)為
圓球形;大腸桿菌使用的菌株為 K12-MG1655,為革蘭氏陰性菌 。
細(xì)胞培養(yǎng) (General cell cultures)
細(xì)胞皆培養(yǎng)于 LB 或 S7 minimal medium,并于指定的溫度。實(shí)驗(yàn)使用 1 mMIPTG 誘導(dǎo) Phyper-spank 啟動(dòng)子的活化。抗生素濃度的使用如下列所示: Kan 6
g/ml, Cm 6 g/ml, Lin 70 g/ml, Erm 1g/ml, Spec 100 g/ml。
螢光顯微鏡 (Fluorescence Microscopy)
進(jìn)行 Time-lapse microscopy 觀察前,會(huì)于 mounting frame (A-7816, Invitrogen)
上鋪上 1% LB agarose,并區(qū)分為有加 1 mM IPTG 與未加 IPTG。細(xì)胞控制約
長(zhǎng)到對(duì)數(shù)期中期,之后將細(xì)胞離心收下并培養(yǎng)在 agarose pad 上。細(xì)胞皆培養(yǎng)
在有溫控的培養(yǎng)箱中,實(shí)驗(yàn)則使用 Axio Observer Z1 進(jìn)行觀察。
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