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作者:YIYI發(fā)布
時(shí)間:2012-3-12 17:38:31
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正文:
實(shí)驗(yàn)步驟:
細(xì)胞培養(yǎng)
HeLa cell in 6 cm dish
Medium : DMEM + 5% FBS + 1% Glutamine + 1% PS
繼代培養(yǎng)
將原培養(yǎng)細(xì)胞之培養(yǎng)液去除
用 1x PBS wash
加入 500 μl Trypsin/EDTA,37℃下放置 1 min
加入 3.5 ml 培養(yǎng)液,以終止 Trypsin 反應(yīng)
將細(xì)胞打散,留 1 ml 培養(yǎng)液于培養(yǎng)皿中,其馀加入試管中
培養(yǎng)皿中加入 2 ml 培養(yǎng)液,將細(xì)胞打散,均勻種回培養(yǎng)皿中
兩天后來看是否均勻、細(xì)胞數(shù)是否過多或太少
細(xì)胞計(jì)數(shù)
取 50 μl 細(xì)胞液至 eppendorf,加入 50 μl trypan blue,Pipeting mix
用血球計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞
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