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顯微鏡鏡檢常用的六種方法！

1. 革蘭氏染色法（Gram staining）﹕于1884年由丹麥微生物學(xué)家Hans Christian Gram所發(fā)明。此鑒別染色法可以將細菌分成革蘭氏陽性菌（G+）及革蘭氏陰性菌（G-），但是高等動物細胞則無法被革蘭氏染色劑染色。革蘭氏染色有四個步驟﹕首先在已固定的抹片上，滴加結(jié)晶紫（crystal violet），經(jīng)過一分鐘讓細菌吸收染劑，然后用水沖掉，加入碘化鉀溶液，碘與結(jié)晶紫和細菌的細胞壁反應(yīng)一分鐘后，用水洗掉，再加入脫色劑，通常是95﹪酒精或丙酮。無法被脫色的細菌，稱為革蘭氏陽性菌，保留染劑的原因與細菌的細胞壁構(gòu)造有關(guān)；而能被脫色的細菌，稱為革蘭氏陰性菌，需要使用對比染色劑番紅（safranin）將被脫色的革蘭氏陰性菌染成粉紅色。

2. 抗酸染色法（acid-fasting staining）﹕又稱Ziehl-Neelsen staining，有些菌體外包脂肪質(zhì)或蠟質(zhì)物質(zhì)，當(dāng)用強脫色劑處理后，仍會保留染色的顏色，這些細菌就叫抗酸菌。染色后的抗酸菌呈粉紅色或紅色，非抗酸菌則為藍色。

3. 鞭毛染色法（flagella staining）﹕鞭毛形體大小接近光學(xué)顯微鏡解像力的限制，所以染色前需先使用染媒，使鞭毛有化學(xué)沉淀生成，增大鞭毛，然后用堿性洋紅染色，染色后鞭毛呈紅色，而細胞為藍色。

4. 莢膜染色法（capsule staining）﹕莢膜為黏質(zhì)外層，成份為多醣體，較難染色，可以使用印度墨水（India ink）行陰性染色（見○圖2-8○）。

5. 孢子染色法（spore staining）﹕使用孔雀綠（malachite green）和番紅（safranine O）染色，孢子染成綠色，而菌體為紅色。

6. 細胞壁染色法（cell wall staining）﹕細胞壁厚，染色不易，但可以先用染媒劑處理，使細胞壁呈正電荷，再用酸性染劑處理。

3、陰性染色法（negative staining）﹕菌體本身不染色，而是將背景部份染色。例如使用印度墨水或黑色素（nigrosin）染色，以油鏡或暗視野顯微鏡鏡檢。

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