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標本制備流程之檢體染色步驟！金相顯微鏡哪有賣？

　　很多種，視需要而定。一般常規(guī)的染色為 H & E，量大時用染色機自動進行。由與染色時使用的染料多為水溶性，無法進入蠟中，因此在染色前玻片上的組織必須經(jīng)過 rehydrate 的過程方能染上，步驟順序與先前的脫水正好相反，一步步地換回去，這些包括在染色機的功能里頭。

　　H & E 的 H 是為 hematoxylin，事實上不是真的堿（需要媒染劑，并且不會在后續(xù)染色中脫落），不過染色結(jié)果卻類似于堿（帶正電）會染上組織中酸性的部分，呈深藍色，是水溶性的染料；而 E 是 eosin，它是一種酸（帶負電），會染上組織中堿性的部分，是紅色的，是溶于酒精的染料，因此在染完 hematoxylin 后要再次脫水，才染 eosin。染料的酸堿與其顏色無關(guān)。組織中可染上堿性染料的基團（帶正電）包括碳酸基（羧基）、磷酸基與硫酸基，三者與堿結(jié)合的能力隨當下 pH 而改變。組織內(nèi)的有些物質(zhì)──比如軟骨基質(zhì)、肝素顆粒，或者粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)──會對一些堿性染料產(chǎn)生“異染色（metachromasia）”的效果，這是因這些位置含有超多的負電，讓吸引的染料產(chǎn)生雙或多聚體的聚合，而聚合之后的顏色與原本不同，比如原本是藍卻染成紅或紫。

　　而與堿性染料不同，影響其與組織結(jié)合的因素不只是電荷而已，不同的酸性染料可有不同的染色效果。因此可以不同之酸性染料反覆染色，制造顏色疊加的效果，比如 Mallory staining 就用了三種酸性染料：aniline blue、acid fuchsin、orange G。不同堿性染料偶爾亦可重複使用，但應(yīng)用范圍遠不及酸性染料廣。

　　染完色后再經(jīng) xylene 置換，以非水性的封片膠與蓋玻片封好，才是能看的玻片。封片的動作在大量時有封片機，小量時則人工完成。而在這之后，才是真正的鏡檢。