標(biāo)題：顯微鏡下簡(jiǎn)稱精液檢查死,活精子！染色的方法
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2012-6-11 11:22:23
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正文:
人工生殖技術(shù)：精液檢查死、活精子之染色：
此法乃利用死、活精子吸收染色劑之差異性為依據(jù)。此試驗(yàn)中，玻片上死亡之精子會(huì)吸收染色劑而呈藍(lán)色，活精子不吸收染色劑而無色。染色劑之配制法如下：
A.染色劑 ─ 2 ％ 水溶性 eosin 溶于 M／8 之磷酸緩沖液中 (pH7.3)
磷酸緩沖劑：80.4 ml M／8 之 Na2HPO4
19.6 ml M／8 之 KH2PO4
B.染色劑 ─ 1 份 Opal blur 加 1 份 M／8 的磷酸緩沖液
A、B 染色劑等量混合，加熱過濾后備用。
染色之方法：
滴 1~2 滴染色劑于乾淨(jìng)載玻片上， 再滴入精液混合，上蓋另一片玻片，去除多馀之染色劑，并用布拭淨(jìng)玻片邊緣，再將 2 玻片分開，置于加熱盤 (65℃) 上使乾燥。
玻片乾燥后，以顯微鏡之高倍 (×1000) 來計(jì)數(shù)。通常計(jì)算精子 333 只，逢機(jī)取樣，若部分精子僅核有染色，判定為死精子�；罹訑�(shù)可以公式＝活精子數(shù)× 3／10＝活精蟲數(shù) ％ 。
五、冷休克：
活精子在冷震盪前以不同染色劑染色，可測(cè)定活精子所佔(zhàn)的％。其方法如下：少量稀釋過的精液樣品浸入 0℃ 水浴中 10 分鐘。俟冷休克后計(jì)算活精子的 ％。使用原精液時(shí)，很多精子會(huì)死，所以可依需要將原精液稀釋，取 1 ml 做試驗(yàn)即可。稀釋液拌演緩沖 劑及精子抵抗冷休克之保護(hù)劑。冷休克后活精子的 ％，在適當(dāng)貯存條件下，可望維持活力 2~5 天。
六、精子的糖分解反應(yīng)：
精子的解糖作用乃其細(xì)胞酵素及其他還原物質(zhì)所致，將葡萄糖還原成酸（乳酸或其他）。許多研究者認(rèn)為精子解糖作用為精子活力之能量來源，與其存活率無關(guān)。影響精子解糖速率之因子如溫度、精蟲活力、糖濃度、氫離子 濃度、酸度等。測(cè)定精子解糖速率是一定時(shí)間間隔前后，測(cè)葡萄糖含量與乳酸含量之化學(xué)分析。培養(yǎng)液中葡萄糖含量減少，酸度上升之變化，與精蟲活力成正比。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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