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室內(nèi)空氣中總細(xì)菌數(shù)檢測(cè)方法

步驟

（一）采樣時(shí)應(yīng)將采樣器置于平臺(tái)處，不可以人員手持采樣器方式進(jìn)行采樣，以避免采樣人員本身造成的污染。采樣器應(yīng)置于距離地面約120至150公分之高度。應(yīng)紀(jì)錄采樣時(shí)采樣器流速、采集時(shí)間和收集空氣樣品之體積等，并同時(shí)記錄采樣點(diǎn)環(huán)境之溫度及溼度。

（二）采樣時(shí)將含培養(yǎng)基之培養(yǎng)皿放置于采樣器內(nèi)，設(shè)定抽取適當(dāng)量之空氣體積，以衝擊方式將生物氣膠微粒收集到培養(yǎng)基上，最佳量之菌落數(shù)為25 – 250個(gè)菌落之間，但抽吸時(shí)間不可超過(guò)10分鐘，以免造成微生物因脫水過(guò)度而無(wú)法培養(yǎng)。采樣皆需進(jìn)行二重複，采樣后應(yīng)于24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室并培養(yǎng)。設(shè)備空白樣品應(yīng)將含培養(yǎng)基之培養(yǎng)皿置入采樣器內(nèi)，置放時(shí)間與樣品采樣時(shí)間相同，但不進(jìn)行抽氣。

（三）進(jìn)行下一個(gè)采樣前，需再以70%酒精擦拭采樣器放置培養(yǎng)皿之部位后，才能進(jìn)行下一次的采樣。

（四）采樣后將培養(yǎng)皿置于30±1℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48±2小時(shí)。

（五）檢測(cè)人員應(yīng)具備區(qū)別細(xì)菌和真菌之能力（如觀察菌落特征或進(jìn)行革蘭氏染色等），或選用五（一）2.所述之添加環(huán)己亞胺的胰蛋白大豆瓊脂培養(yǎng)基，以使總細(xì)菌數(shù)之計(jì)數(shù)更為正確。

（六）計(jì)數(shù)各培養(yǎng)皿中所產(chǎn)生的細(xì)菌菌落，并記錄之。若菌落太多或雜菌菌落數(shù)太多造成判讀困難，則以”菌落太多無(wú)法計(jì)數(shù)”（Too numerous to count；TNTC）表示。

八、結(jié)果處理

（一）二重覆的兩個(gè)培養(yǎng)皿細(xì)菌菌落數(shù)相加計(jì)算其平均值。惟使用單（多）階多孔洞采樣器（Single or Multi-stage multi-orifice sampler）之菌落數(shù)計(jì)算方式，應(yīng)于完成菌落計(jì)數(shù)后，參照采樣器原制造廠商提供之校正表（positive hole correction table）先行換算，再計(jì)算其平均值。

（二）平均值除以采樣時(shí)所抽取之總空氣體積(需以采樣前后之平均流量求取總空氣體積)，得到一立方公尺空氣中總細(xì)菌數(shù)的濃度，單位以CFU/m3（colony forming unit/cubic meter）表示。

（三）檢測(cè)紀(jì)錄須注明采樣時(shí)間、培養(yǎng)起始及終了時(shí)間、培養(yǎng)基名稱、培養(yǎng)溫度等。

九、品質(zhì)管制

（一）微生物采樣人員及檢測(cè)人員應(yīng)具備微生物基本訓(xùn)練及知識(shí)。

（二）進(jìn)行微生物檢測(cè)時(shí)，所用的盛裝器具均應(yīng)經(jīng)滅菌處理。

（三）每次采樣時(shí)，應(yīng)進(jìn)行運(yùn)送空白。每批次需進(jìn)行一次設(shè)備空白�？瞻讟悠方�(jīng)培養(yǎng)后均不得檢出。

（四）每個(gè)采樣點(diǎn)需至少進(jìn)行二重複。

（五）培養(yǎng)基需保存于4± 2℃，保存期限不得超過(guò)14天。

（六）采樣器需進(jìn)行采樣前之流量校正及采樣后之流量量測(cè)，所測(cè)得之流量前后差異不得超過(guò)±10%。且流量校正器需經(jīng)定期一年校正一次。