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正文:
印漬法
使用凝膠電泳只能分析出DNA片段或蛋白質(zhì)片段有幾種不同的長度,卻不知道這幾種DNA片段的A、T、G、C如何排列組合,也不知道這幾種蛋白質(zhì)片段的胺基酸如何排列組合,要知道它們實際的排列組合必須使用「印漬法」。
南方印漬法
可以用來偵測DNA片段的A、T、G、C如何排列組合,轉(zhuǎn)印時必須在堿性的溶液中進(jìn)行,
使雙股DNA分開,由于PFGE凝膠電泳中所使用的凝膠不適合直接與DNA探針雜交,所以必須先將凝膠內(nèi)的DNA片段「轉(zhuǎn)印」到尼龍膜上,再與DNA進(jìn)行探針雜交。
將凝膠內(nèi)的DNA片段「轉(zhuǎn)印」到尼龍膜上,轉(zhuǎn)印完成后,得到的條紋只知道DNA片段共有6種不同的長度,卻不知道這6種DNA片段的A、T、G、C如何排列組合,這個時候我們可以將已知A、T、G、C序列的探針DNA(末端具有螢光物質(zhì))散布在尼龍膜上,假設(shè)探針DNA的序列為TTAGGG,如圖16-23(b)所示,結(jié)果會使尼龍膜上的其中4個條紋發(fā)光,代表這4段DNA的序列為AATCCC。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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