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正文:
學(xué)習(xí)怎樣對試樣染色后做
顯微鏡鏡檢-
生物學(xué)常識
實驗一、革蘭氏染色法
內(nèi)容
目的:學(xué)習(xí)革蘭氏染色法,可區(qū)分革蘭氏陽性菌G(+)和革蘭氏陰性菌G(-)。
原理:革蘭氏染色是普遍的染色技巧,在步驟中最重要的決定因子,為不同細(xì)胞壁的化學(xué)性及物
理性會使脫色劑對其造成的收縮及脫色速度上的差異,而革蘭氏陽性菌(Gram positive bacteria)的
細(xì)胞壁較厚,由【勝肽聚糖(Peptidoglycan)和臺口酸(Teichoic acid)組成】,所以脫色過程中,
會保存初染劑的是革蘭氏陽性菌,而革蘭氏陰性菌(Gram negative bacteria)的細(xì)胞壁較薄,是由【勝
肽聚糖(Peptidoglycan)、外層膜(Outer membrane)、磷脂質(zhì)(Phospholipid)、孔蛋白(Porin)、
脂多糖(Lipopolysaccharides)組成】當(dāng)酒精脫色時,脂質(zhì)會被溶解而把初染劑沖洗掉,是革蘭氏
陰性菌。
材料:顯微鏡、酒精燈、接種環(huán)、染劑(結(jié)晶紫、碘液、95%酒精、番紅)。
標(biāo)準(zhǔn)菌株:沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌。
步驟:slide 清洗烘干→取無菌水→取1loop 菌涂開→烘干固定→結(jié)晶紫(30s)→背面水洗→碘酒
(30s)→背面水洗→酒精脫色→背面水洗→番紅覆染→背面水洗→拭干→顯微鏡鏡檢。
結(jié)果
1. 長桿狀G(+)乳酸桿菌(Lactobacillu)。
2. 葡萄球狀G(+)金黃色葡萄球菌(S.aureus)。
3. 短桿狀G(-)沙門氏菌(Salmonella)
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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