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正文:
在顯微鏡的觀察下,酵母菌細(xì)胞為圓形顆粒,即使?jié)舛鹊,也因酵母菌以出芽方式生殖?/div>
子代與親代尚未完全分離而集結(jié),濃度低(顆粒計(jì)數(shù)器小方格內(nèi)約10個(gè)左右)時(shí)雖計(jì)算較方便,
方格間計(jì)數(shù)變異大,且剛出芽的子代有時(shí)很小,容易忽略,計(jì)數(shù)每個(gè)樣品的細(xì)胞數(shù)所發(fā)時(shí)間多,
但酵母菌約90分鐘可分裂一次,意即90分鐘后細(xì)胞數(shù)增加一倍,時(shí)間不宜延遲太久。故一次處理樣本數(shù)不多。
而與John Wiley 2002所統(tǒng)計(jì)分析得計(jì)算公式(如下式)相差1 倍。
0.1 OD600=1.8 X 106 cell/mL,故本試驗(yàn)以1 OD600=9 X 106 cell/mL估算細(xì)胞個(gè)數(shù)。
酵母菌液細(xì)胞個(gè)數(shù)與
分光光度計(jì)吸光值線性動(dòng)態(tài)范圍
分光光度計(jì)在細(xì)胞濃度過(guò)高時(shí),是否仍遵行上式估計(jì)公式,為本試驗(yàn)應(yīng)考量的因子。
以分光光度計(jì)檢測(cè)細(xì)胞數(shù),其吸光值與細(xì)胞個(gè)數(shù)呈線性相關(guān),可依上數(shù)之公式套用。
將培養(yǎng)24小時(shí)的菌液連續(xù)稀釋,以分光光度計(jì)波長(zhǎng)600 nm 測(cè)其吸光值套用估算公式其結(jié)果,
并取稀釋的菌液以分光光度計(jì)計(jì)算其細(xì)胞數(shù),發(fā)現(xiàn)在濃度低時(shí),兩種測(cè)值接近,濃度過(guò)高因顯微鏡僅能
以稀釋倍數(shù)推估,而高濃度時(shí)分光光度計(jì)的推估值遠(yuǎn)低于顯微鏡的推估值。
此結(jié)果建議細(xì)胞濃度過(guò)高應(yīng)經(jīng)過(guò)稀釋,以免低估其細(xì)胞數(shù)
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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