標(biāo)題：熒光顯微鏡觀察細(xì)胞恒定流動(dòng)顯微注射實(shí)驗(yàn)
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2013-12-2 23:21:30
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正文:
熒光顯微鏡觀察細(xì)胞恒定流動(dòng)顯微注射實(shí)驗(yàn)
◇注射量依賴于注射液中樣品濃度、通過(guò)針尖的速度和針尖停留在細(xì)胞內(nèi)的時(shí)間
◇在某些情況下，利用顯微鏡載物臺(tái)控制針下靶細(xì)胞的位置，可很有效地使針尖集中
在小視野內(nèi)，然后使用操作儀的垂直控制軸刺入細(xì)胞中:
◇有時(shí)估計(jì)出注射量是很重要的，通過(guò)注射一些熒光標(biāo)記物建立了一些標(biāo)記方法這
些方法中，一個(gè)是熒光標(biāo)記物的發(fā)散強(qiáng)度是可以光測(cè)量的(如Rhodamine-dextran)
二利用注射物的量子發(fā)生知識(shí)能估計(jì)出注射量。然而應(yīng)強(qiáng)調(diào)的是尚沒(méi)有可
靠的方法去測(cè)定細(xì)胞質(zhì)的體積.因此精確測(cè)定最后注射人細(xì)胞質(zhì)樣品的濃度足不可
能的。
◇注射速度過(guò)快能擾亂細(xì)胞質(zhì)成分，細(xì)胞裂解或細(xì)胞從底層移位。當(dāng)注射體積小于估
計(jì)的細(xì)胞體積的50%，并且注射樣品的流動(dòng)速度兒乎不導(dǎo)致可見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)移位時(shí).
注射的效果最好
◇恒定流動(dòng)方法需要相當(dāng)量的樣品;
◇這種方法須露出注射和非注射樣品細(xì)胞的表面。
◇較好的練習(xí)方法是注射溶于無(wú)鈣PBS中。0.01%熒光葡聚糖(10kDa;分子探針)，
用熒光顯微鏡觀察可證實(shí)進(jìn)行了成功的注射
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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