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正文:
上海光學(xué)儀器一廠
熒光顯微鏡物鏡的特點(diǎn)
1.用波長(zhǎng)合適(依
熒光團(tuán)而定)且能量足夠(但不引起光漂白)
的激發(fā)光照射標(biāo)本。
2.觀察熒光時(shí),不要受任何激發(fā)光的污染。
3.光源必須在較窄的光譜范圍內(nèi)提供較多的激發(fā)能量。
4.選用的濾光片應(yīng)透射需要的波長(zhǎng),阻斷不需要的波長(zhǎng)。
5.物鏡應(yīng)有較高的透射率,從紫外光到大部分可見(jiàn)光譜
6.選用最大NA的物鏡。一個(gè)好的經(jīng)驗(yàn)就是,如果選用的物鏡孔徑大2倍,
那么它收集的熒光就多4倍。
7.選用折射率合適的(n=1.51)、非自發(fā)熒光性的、不含PCB的浸油,來(lái)消除表面反
射造成的光丟失。
8.
顯微鏡的所有光學(xué)部件都不可產(chǎn)生自發(fā)熒光。自發(fā)熒光會(huì)增強(qiáng)背景亮度,降低圖像
反差。
9.物鏡鏡頭一定要清潔。
10.選用合適厚度(0. 17mm)的蓋玻片。對(duì)于NA>0.7的物鏡來(lái)說(shuō),蓋玻片厚度在
0.17±0.01mm范圍內(nèi)有所浮動(dòng),依然可呈現(xiàn)高清晰的圖像;當(dāng)物鏡0. 7>NA>0.3時(shí),
蓋玻片厚度在(0.17±0.03) mm范圍內(nèi)有所浮動(dòng),依然可呈現(xiàn)高清晰的
圖像。
11.浸油層一定要避免氣泡。
12.應(yīng)關(guān)閉視場(chǎng)光闌以提高反差。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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