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正文:
生物分子的樣品-
熒光顯微技術(shù)的原理和應(yīng)用
熒光光潛分析是單分子檢測的一種方法。單分子的熒光探測已經(jīng)成功地擴(kuò)
展到了生物系統(tǒng)
單分子探測可被用于研究分子機(jī)動原理、DNA轉(zhuǎn)錄、酶反應(yīng)、蛋白質(zhì)動力和細(xì)胞
信號.單分子探測與大量分子探測只能給出整體平均特性不同,它允許我們了
解單獨(dú)的生物分子的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系。
單分子探測用熒光對生物分子或生物高聚物進(jìn)行標(biāo)記。一個理想的選擇是
量子效應(yīng)接近于I的熒光標(biāo)記,這樣能得到最大的激發(fā)輻射。最先
進(jìn)的光電子探測系統(tǒng)(轉(zhuǎn)換單光子成為電信號)已經(jīng)能達(dá)到單光子探測的極限,
從而極大地促進(jìn)了這一領(lǐng)域的發(fā)展。需要指出的是,單分子探測并不總是指對
孤立的單個分子的觀測.其觀測一般用以下兩種方法:
1.在稀釋極限下探測只含有一個分子或生物分子的樣品。
2.探測結(jié)合到一個可以觀測和跟蹤的精細(xì)微球上的單分子。
可以用一種玻璃顯微操作針來對這些生物分子進(jìn)行控制。而很多研究是用
光鑷捕獲連接單分子的微球。
用于單光子探測的熒光探測方法還有:熒光壽命、雙光子激發(fā)、極化各向異
性和熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET).單分子熒光壽命
測量借助了時間關(guān)聯(lián)單光子
檢測技術(shù)及其應(yīng)用(( Lee等,2001)。顯微技術(shù),如共聚焦
顯微鏡和近紅外顯微
鏡,提供了染色細(xì)胞或單細(xì)胞聚合體的成像能力,
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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