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正文:
利用顯微鏡研究植物上細(xì)菌行為的最新進(jìn)展在很大程度上要?dú)w功于GFP的發(fā)現(xiàn)。
作為一種
熒光基因,GFP的優(yōu)點(diǎn)在于熒光強(qiáng)度明亮且相對(duì)穩(wěn)定,功基因可在大多數(shù)細(xì)
菌中表達(dá),可作為胞內(nèi)標(biāo)記而不需底物。因此,不需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理而可以直接在
顯微鏡下進(jìn)行觀察,
研究過程中環(huán)境對(duì)細(xì)菌細(xì)胞的破壞程度會(huì)降到最小,而采用熒光免
疫標(biāo)記或電子顯微鏡技術(shù)會(huì)產(chǎn)生很多潛在的偽像。此外,GFP突變體能增強(qiáng)熒光強(qiáng)度,
并且可在不同可見波長激發(fā)下發(fā)射熒光,這一點(diǎn)為研究者研究自體熒光背景下的GFP
信號(hào)檢測(cè)問題提供了靈活多樣的研究工具。這個(gè)問題在植物組織中很常見,
因?yàn)榭梢娂ぐl(fā)波長區(qū)段不同而造成的植物組織發(fā)出的熒光強(qiáng)度也有所不同。
而雜散熒光對(duì)圖像的污染會(huì)使這一問題更加嚴(yán)重,但是通過使用共聚焦顯微鏡可使影響
程度降到最小。
因?yàn)楣簿劢辜す鈷呙栾@微鏡(CISM)僅僅收染來自聚焦平面的熒光信號(hào),并通過針孔阻
止其他散射光.所以,共聚焦激光掃描顯微鏡能大大改善植物上的熒光標(biāo)記細(xì)菌的觀察
效果。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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