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正文:
細胞的細微結(jié)構(gòu)標(biāo)記實驗用
熒光顯微鏡圖像分析軟件
當(dāng)微注射多克隆或單克隆抗體,或偶聯(lián)
熒光的分子時,對其進行檢測的實驗步驟較
短;旧希覀儼凑丈鲜龅姆椒右愿倪M就可以了,即省去與第一抗體的濫育過程。如
果注人的是熒光標(biāo)記分子,我們只需進行固定與封片兩個過程。但是根據(jù)實驗條件,盡管
已經(jīng)進行了微注射,可能也需要與第一抗體進行進一步的溫育
利用抗體和電子致密標(biāo)記物,用電子
顯微鏡進行細胞外和細胞表面的抗原定位,在過
去的二十年間己經(jīng)證明是非常有效的工具。但是細胞內(nèi)成分的定位困難較大,因為必須
為抗體和標(biāo)記物提供通路.同時又不能明顯地改變細胞的細微結(jié)構(gòu).克服這一問題有如下
兩個策略:
.利用去污劑或極性溶劑對固定細胞進行透化處理,這樣會在一定的程度上(或是全部)
破壞細胞膜,使抗體與標(biāo)記物能夠進人細胞。然后再對細胞做后固定和用普通環(huán)氧樹
脂包埋處理。這種技術(shù)被稱為前包埋免疫細胞化學(xué)方法。
.先包埋固定的細胞,切片,然后與抗體和標(biāo)記物一起溫育。這種技術(shù)稱為后包埋免疫細
胞化學(xué)方法。包埋在低溫下進行.即在部分水溶性樹脂中或在含有冷凍保護劑的冰凍
溶液中進行。
免疫電子顯微鏡技術(shù)常采用如下的標(biāo)記物:
.辣根過氧化物酶(HRP)
.膠體金顆粒
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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