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正文:
免疫熒光法將熒光素與特異性抗體球蛋白用化學方法結合起來,但
不影響特異性蛋白質的免疫特性,制備成熒光抗體。當熒光抗體與
相應抗原(直接法)或抗原一抗體復合物(間接法)相結合時,即形成
免疫熒光復合物,可用
熒光顯微鏡觀察反應結果,若顯示亮綠色熒光,
即表示存在有相應的抗原或抗原一抗體復合物。目前最常用熒
光素為異硫氰酸熒光黃和羅達明。檢測抗體可用間接免疫熒光法。
間接法是將抗原與未標記的特異性抗體(如患者血清)結合,然后再
使之與熒光標記的抗免疫球蛋白抗體(抗抗體)結合,三者的復合物
可發(fā)出熒光。本法的優(yōu)點是制備一種熒光標記的抗體,可以用于多
種抗原、抗體系統(tǒng)的檢查,即可用以測定抗原,也可用來測定抗體
注意事項
(1)在進行免疫熒光抗體試驗時,要注意充分洗滌以避免非特異性
熒光。
(2)經免疫熒光抗體試驗后,應及時在熒光顯微鏡下觀察結果。如
不能及時觀察應注意避光保存,以免熒光消退影響結果。
免疫熒光技術具有快迅、敏感、應用范圍廣等優(yōu)點,但其不足之處
是熒光易消退,難以得到永久性標本,非特異熒光干擾較多,結果
判斷的客觀性差,需高精密的熒光顯微鏡設備等,使其應用受到一
定限制。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科