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正文:
細(xì)胞懸浮液中通過
測(cè)量細(xì)胞數(shù)目和裝滿了細(xì)胞的體積
用培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的組織和細(xì)胞,使由于有機(jī)體多細(xì)胞狀
態(tài)所產(chǎn)生的一些物理的、生理的和生化的限制作用被降低到
最小的程度,因此,這種技術(shù)已廣泛地應(yīng)用于發(fā)生學(xué)、生理學(xué)、
病理學(xué)和藥理學(xué)的研究之中。從它最根本的意義上說,這種
技術(shù)可以研究細(xì)胞的發(fā)育潛能(或全能性),即只要具備恰當(dāng)
的化學(xué)和物理的環(huán)境,在它的遺傳素質(zhì)的范圍內(nèi)由一種細(xì)胞
形成任何一種其他細(xì)胞類型的能力。雖然動(dòng)植物的組織和細(xì)
胞培養(yǎng)的基本原理是相似的,但是,植物組織在較簡(jiǎn)單的培養(yǎng)
基中一般能更好地進(jìn)行細(xì)胞增殖。
植物的各部分,如根和莖,可以在無(wú)菌的條件下把它們切
下來,轉(zhuǎn)移到一個(gè)能維持它們生長(zhǎng)和發(fā)育的培養(yǎng)基中進(jìn)行培
養(yǎng)。動(dòng)物和植物的細(xì)胞可以從適當(dāng)?shù)牟课磺邢拢瑯影阉鼈?/div>
轉(zhuǎn)移到一種合適的半固體或液體的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。已使
用的各種培養(yǎng)基都十分復(fù)雜,但一般都由含碳的化合物(如
糖)、各種無(wú)機(jī)鹽、微量元素、維生素和生長(zhǎng)因子等組成。
在這些培養(yǎng)基中經(jīng)常另外補(bǔ)充一些復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)物,例如
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用的血清,植物細(xì)胞培養(yǎng)用的椰汁。但是,在可
能的情況下最好使用一種完全確定了的培養(yǎng)基,以便可完全
重復(fù)地制備。細(xì)胞在一個(gè)適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中生長(zhǎng)j分裂成細(xì)胞
團(tuán).實(shí)驗(yàn)工作就可以在這團(tuán)細(xì)胞卜進(jìn)行。當(dāng)對(duì)通氣培養(yǎng)有一
個(gè)特殊的需要時(shí),正如液體懸浮培養(yǎng)中可能需要的那樣,培養(yǎng)
物可以在一個(gè)錐形瓶或特殊設(shè)計(jì)的培養(yǎng)瓶中旋轉(zhuǎn)或振蕩。如
果需要單細(xì)胞的懸浮液,要使細(xì)胞不聚集往往是很困難的。有
時(shí)候用酶來處理聚集的細(xì)胞,如動(dòng)物細(xì)胞用胰蛋白酶,植物細(xì)
胞用果膠酶,將能有助于細(xì)胞的解聚。
在細(xì)胞懸浮液中通過測(cè)量細(xì)胞數(shù)目和裝滿了細(xì)胞的體積
(這二項(xiàng)結(jié)合起來可以估價(jià)細(xì)胞的大小)來測(cè)定生長(zhǎng),這要比
在整體組織中更容易一些。一種化合物能很直接地加到培養(yǎng)
基中而定量的給予細(xì)胞,并且能很容易地觀察它對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)
和代謝過程的影響。這種技術(shù)發(fā)展到能對(duì)去掉了細(xì)胞外壁的
植物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)(原生質(zhì)體培養(yǎng)),從而進(jìn)一步擴(kuò)大了這種
技術(shù)的潛力。為了維持病毒生長(zhǎng),在培養(yǎng)基中使用動(dòng)物細(xì)胞
是這個(gè)技術(shù)的一個(gè)重要的應(yīng)用。
當(dāng)然,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是微
生物學(xué)家用來培養(yǎng)足夠量的藻
類、真菌和細(xì)菌以便在它們上面進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究的主要手段。固
體和液體的介質(zhì)都可以用作
微生物的生長(zhǎng),但是,一般地說,培
養(yǎng)基的化學(xué)成分不象動(dòng)物和高等植物細(xì)胞培養(yǎng)中那樣復(fù)雜。
微生物的生長(zhǎng)速度也比其他細(xì)胞培養(yǎng)快得多,因此,要保持植
物和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌是比較困難的,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中任何
微生物的感染,將會(huì)使微生物在培養(yǎng)基的原點(diǎn)很快的蔓延。
和各種離體技術(shù)一樣,在把細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果延伸到整體
狀態(tài)時(shí)就可能會(huì)出現(xiàn)問題。對(duì)動(dòng)物和植物細(xì)胞培養(yǎng)尤其如此,
因?yàn)樵谂囵B(yǎng)條件下細(xì)胞趨向于去分化。
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