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正文:
無細胞和細胞的體外模型系統(tǒng)的應(yīng)用使細胞周期研究最近取得了長
足的進展。另一方面,它們和原位(即在組織和器官中)狀態(tài)的關(guān)系
,對更好地理解細胞周期的
生物學以及將迄今獲得的知識用于臨床
的初始階段是至關(guān)重要的。
我們將概述細胞周期蛋白的組織處理和免疫組化染色的某些基
本方案。雖然沒有在組織切片上對每種蛋白都可以作免疫檢測的通
用程序,但下述的步驟,以及可能的修改建議,必將可以使研究者
設(shè)計出一個對任何有興趣的細胞周期蛋白進行免疫組化分析的程序
。
下列特點使得細胞周期蛋白的免疫組化檢測特別有吸引力。
·自然組織環(huán)境中細胞蛋白質(zhì)的檢測,沒有各種與體外模型必
然相關(guān)的人工產(chǎn)物。
·與基于檢測細胞/組織的提取物的免疫印跡或核酸分析(僅
提供一個組織平均資料)不同,免疫組化更集中于單細胞水平的分
析。
·通過組織切片的免疫染色所獲得的信息,包括亞細胞定位、
基因的組織或細胞型特異性表達和蛋白質(zhì)含量的半定量估計
組織準備和儲存
許多細胞周期調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)是擺動的或不穩(wěn)定的多肽,因此,快
速地處理這些組織(最好在組織切離后數(shù)分鐘內(nèi)),必須保存足以供
免疫組化檢測的未降解的靶抗原水平。最常用的兩種組織保存方法
是:
·將制備冰凍叨片的標本冰凍
·將制備石蠟切片的標本固定和石蠟包埋
前一過程比較溫和,因此更能保存完整的靶抗原表位。后一過
程提供更多的組織學細節(jié),標本能長期使用,并代表了檔案組織病
理學材料常常藉此收集的傳統(tǒng)途徑。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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