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正文:
基因芯片制備過程和制備方法簡(jiǎn)介-光學(xué)技術(shù)
基因芯片制備過程十分復(fù)雜,制備方法主要包括原位合成制備
和自動(dòng)分區(qū)點(diǎn)樣制備兩種方法。其中基因芯片自動(dòng)分區(qū)點(diǎn)樣制備方
法因分區(qū)點(diǎn)樣速度快、試驗(yàn)通量大、核酸擴(kuò)增量顯著、試驗(yàn)反應(yīng)速
度快、基因表達(dá)差異性顯著而得到廣泛采用。在基因芯片制備過程
中.
生物科學(xué)工作者必須根據(jù)特定應(yīng)用要求合理設(shè)計(jì)與靶基因匹配
的探針,并利用
熒光染色劑對(duì)靶I)NA分子進(jìn)行熒光標(biāo)記。然后再利
用生物芯片點(diǎn)樣設(shè)備將探針分子基團(tuán)固定在芯片基片上。為提高檢
測(cè)靈敏度,首先必須對(duì)待測(cè)定的靶基因進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)。之后可
獲得上百到上萬(wàn)倍的靶基因拷貝;然后令擴(kuò)增后的靶分子與芯片基
片上的探針分子在基因芯片微反應(yīng)池中的液體環(huán)境及恒溫條件(通
常為45℃~50℃)下進(jìn)行雜交反應(yīng)(如果靶分子和探針分子堿基配對(duì)
,則二者進(jìn)行雜交反應(yīng).否則不進(jìn)行雜交反應(yīng))。因此.雜交反應(yīng)
結(jié)束后。有反應(yīng)的樣點(diǎn)位置上有熒光發(fā)出,否則無熒光發(fā)出。為避
免噪聲干擾后續(xù)雜交熒光信號(hào)檢測(cè),芯片雜交后需利用專用液體對(duì)
芯片進(jìn)行清洗,然后將芯片晾干冷藏備用.至此完成基因芯片制備
過程。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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