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正文:
0.2微米微孔濾膜適于一般情況滅菌-細(xì)菌
顯微鏡
溶液的過濾除菌
許多用于細(xì)胞培養(yǎng)的溶液中含有一種或多種對熱不穩(wěn)定的成分
(如抗生素),或幾種成分構(gòu)成的體系(如磷酸鹽緩沖體系),如果將
它們進行高壓蒸汽消毒,則會生成有毒的沉淀物。因此,使用膜濾
器對這些溶液進行冷消毒是最普遍的方法。
0.2微米微孔濾膜適于一般情況滅菌;然而,一些環(huán)境應(yīng)激細(xì)
菌(如假單胞菌屬SP.)及支原體就能夠通過這類濾膜。為了能最大
限度地去除這些組織培養(yǎng)中常見的微
生物污染,就要采用孔徑為0
.1微米微孔濾膜過濾培養(yǎng)液和血清。濾膜制造商可提供不同類型
的濾膜。就細(xì)胞培養(yǎng)而言,醋酸纖維素或硝酸纖維素濾膜通常用于
過濾諸如培養(yǎng)液和緩沖液等液體。值得注意的是,在使用前應(yīng)該用
熱的去離子水沖洗薄膜,清除其中可能引起細(xì)胞毒性的可溶性物質(zhì)
。尼龍膜含較少的表面活化劑或潤濕劑等可溶性物質(zhì);聚乙烯磺酸
膜中含少量的可溶性物質(zhì)并很少與蛋白質(zhì)結(jié)合。
確定和控制細(xì)胞培養(yǎng)的
微生物污染
細(xì)菌和真菌污染可以通過在有利于細(xì)菌、真菌和酵母生長的條
件下直接培養(yǎng)而檢測。同樣地,檢測支原體污染的直接方法也可用
微生物培養(yǎng)基促使支原體繁殖,再進行篩查。微生物污染能夠通過
使用抗生素而得到控制。微生物污染的檢測應(yīng)列人細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量控
制的常規(guī)項目。微生物和支原體的檢測還應(yīng)在剛收到細(xì)胞系時,為
細(xì)胞庫主庫和運作庫以及保種所準(zhǔn)備的安瓿樣本進行檢查。這種檢
查還可以在任何時候、懷疑有污染、沒有抗生素存在而細(xì)胞已經(jīng)培
養(yǎng)了幾個星期的情況下進行。
注意:為了避免細(xì)胞系不小心被污染,細(xì)菌、真菌的檢測應(yīng)在
不從事細(xì)胞培養(yǎng)的實驗室中進行。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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