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正文:
液氮保存法(一196℃)
適用范圍
根據(jù)過去的經(jīng)驗和研究,得知大多數(shù)
微生物可用液氮保存。例
如,除病毒、噬菌體、立克次氏體、各種細菌、放線菌、真菌、螺
旋體、變形菌類、各種絲狀菌、酵母、微小藻類、原蟲之外,動物
細胞(紅細胞、精子、癌細胞等)也可利用液氮保存。在這種意義上
,本法可說是適用范圍最廣的微生物保存法。特別是對霉菌的菌絲
、大多數(shù)藻類、原蟲等冷凍干燥較困難的微生物的長期保存非常有
利。
一般的實際操作
在一196℃下保存微生物時,其生存率的高低,受降溫過程冷
凍速度的影響特別顯著,因此,對溫度的調(diào)節(jié)要充分注意。在冷凍
保存中,如果溫度上升,冰晶狀態(tài)發(fā)生變化,就易導(dǎo)致菌的死亡。
因而要常常注意液氮的殘存量,定期補添。
取將要保存的微生物的菌體,使之盡量濃厚地懸浮于含有適當
防凍劑的滅菌溶液(分散劑,其組成參閱各論)中。將這種菌液(O.
2~1毫升)分裝于安瓿中,或者先把分散劑分裝于安瓿中,再用白
金耳取斜面培養(yǎng)的菌體,移入安瓿內(nèi)制備菌液亦可。另外,還有用
適當粗細的軟木鉆孔器鉆取菌絲覆蓋的瓊脂平板,取數(shù)個使之懸浮
于分散劑的方法。霉菌的冷凍保存,不加防凍劑時生存率較高,應(yīng)
特別注意。
分裝菌液的安瓿要用煤氣燈熔封,為了檢驗熔封的良否,可在
4℃下在適當?shù)纳匾褐薪?0---30分鐘。
出自http://www.bjsgyq.com/
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