標(biāo)題：污泥的培養(yǎng)(培菌)快速簡便的特點-圖像顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2017-1-20 12:54:36
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正文:
污泥的培養(yǎng)(培菌)快速簡便的特點-圖像顯微鏡
活性污泥的培養(yǎng)(培菌)
當(dāng)質(zhì)粒較大時可考慮用膜吸附法或用非離子型去污劑初步抽提，然
后用CsCl法進(jìn)一步純化。相反，當(dāng)質(zhì)粒DNA的宿主菌為JM系列或HBl01、
TGl等衍生菌株時不宜用CsCl法純化，這是因為這些菌中含有大量的糖
類物質(zhì)，CsCl離心后會在超螺旋質(zhì)粒DNA位置形成一條致密與模糊的區(qū)
帶，難以完全除盡這些糖類物質(zhì)，從而造成抑制后續(xù)酶反應(yīng)進(jìn)行。除糖
類物質(zhì)外，這類菌株中還含有較多核酸酶，也不適于用煮沸法、酚／氯
仿等快速法抽提質(zhì)粒。因為以上方法雖然步驟簡單但往往不能使DNA酶
徹底變性失活，嚴(yán)重時甚至使抽提產(chǎn)物降解。當(dāng)質(zhì)粒DNA要長期使用時
也不宜用快速法抽提，以防止保存過程中殘留的微量核酸酶降解DNA。
此外，選擇DNA提取方法還須考慮質(zhì)粒DNA的用途。如DNA僅用于抽提后
檢測插入片段時，則可選用快速的酚／氯仿法。如果插入片段用于標(biāo)記
探針且與同類宿主菌的DNA雜交時，就不能選用此法，這是因為酚／氯
仿抽提質(zhì)粒時未能將所有染色體DNA全部變性除去，酶切后回收的插入
片段中可能含有極微量的染色體DNA。相反，如果用于酶切鑒定時，這
些未除盡的染色體DNA很少，不會干擾反應(yīng)，這時選用快速提取法便顯
出快速簡便的特點，特別有利于大量篩選重組子。當(dāng)然，除了標(biāo)記探針
外，質(zhì)粒用于測序等時需要高純度DNA，應(yīng)該應(yīng)用堿法、CsCl法或膜吸
附法提取。總之，選擇抽提方法時要根據(jù)具體情況
而定。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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