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正文:
玻璃紙透析培養(yǎng)法是另一種觀察產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)分析
顯微鏡
玻璃紙透析培養(yǎng)法是另一種觀察產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)的方法。玻璃紙是一種半
透性膜,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分可通過滲透作用透過玻璃紙,真菌能在上
面生長,這種方法可在真菌生長的不同時(shí)間觀察到生長過程,以及產(chǎn)孢
結(jié)構(gòu)等方面的形態(tài)特征。其操作程序如下:
(1)向斜面菌種試管中加入5ml無菌水或無菌吐溫一80水(o.1%),
洗下孢子制成孢子懸浮液。
(2)用無菌鑷子將已滅菌的圓形玻璃紙(其直徑同培養(yǎng)皿)平展地覆
蓋于培養(yǎng)基平板上。
(3)用1m1無菌吸管吸0.2m1孢子懸液于上述玻璃紙平板上,用無菌
玻璃刮棒涂抹均勻。
(4)置28℃或室溫培養(yǎng)至開始產(chǎn)孢后,打開皿蓋用鑷子將玻璃紙與
培養(yǎng)基分開,再用剪刀剪取小片置于載玻片上,用顯微鏡觀察。
透明膠帶快速制片法 通過載片培養(yǎng)雖能較好地獲得完整的產(chǎn)孢結(jié)
構(gòu),但比較費(fèi)事耗時(shí),蓋片上的孢子鏈或孢子團(tuán)遇水即散,有時(shí)還會(huì)失
敗于雜菌污染。為了能快速而準(zhǔn)確地將蟲尸標(biāo)本或培養(yǎng)物至少鑒定到屬
,可利用市售透明膠帶制片。將膠帶撕開剪取約10×10mm的小方塊后,
直接與蟲尸表面的子實(shí)層接觸并輕壓,粘取產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。對(duì)于培養(yǎng)物可切
取5×5ram小塊,將子實(shí)層與膠帶壓觸。粘有產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)的膠帶可經(jīng)結(jié)晶
紫染色后制成永久玻片。這種制片法不僅保存有完好的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu),而且
孢子鏈或孢子團(tuán)也不會(huì)在染色中被破壞。此外,也可剪一段膠帶投入二
甲苯中將膠溶化,滴在標(biāo)本或培養(yǎng)物上,待二甲苯揮發(fā)后即剩下粘有產(chǎn)
孢結(jié)構(gòu)的一層膠膜,撕下后即可染色制片。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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