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體積排阻層析技術(shù)(凝膠過濾)測定分子質(zhì)量
體積排阻層析法(凝膠過濾)測定分子質(zhì)量
體積排阻層析(SEC)是測定蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的常用方法之一。
凝膠過濾是體積排阻層析的一種,用水作流動相,而體積排阻層析
的流動相既可以是水也可以是其他溶劑。層析用的支持物或凝膠溶
脹后形成多孔顆粒,溶質(zhì)分子的洗脫由于分子質(zhì)量小的物質(zhì)可滲人
多孔顆粒的內(nèi)部,受到的阻滯作用大,流程長;而較大的分子,根
據(jù)體積大小而排阻在多孔顆粒的外面,所以大分子優(yōu)先于小分子被
洗脫出來。
管底穿刺蠕動洗脫分離法
盡管大量的層流使區(qū)帶擴展,但是蠕動洗脫技術(shù)因具有全自動
、使用簡便、儀器普通、速度快和相對容易安裝的特點而被廣泛應
用。添加材料(其他材料見基本方案2)待洗脫的梯度管(見基本方案
l或備擇方案1)模仿梯度(與樣本所用梯度相同)蠕動泵帶有收集管
的部分收集器(12mmX 75mm管或1.5ml微量離心管)玻璃微孔毛細吸
量管微孔管中央有孔的離心管帽離心管架1.將蠕動泵與帶有微量
試管的部分收集器按順序連接起來。用與實驗中所用溶液成分
相同的模擬梯度測定泵速,使液體從出口以0.5~lml/min的速
度緩慢流出。將全部
梯度洗脫入指定的編號試管中,
測量所需組分的體積。準備帶有
適當數(shù)量試管的部
分收集器,多準備些試管以防收集器出現(xiàn)問題。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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