標(biāo)題：應(yīng)用顯微鏡觀察到單細(xì)胞的朝向和定向遷移
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2017-3-16 17:25:52
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正文:
應(yīng)用顯微鏡觀察到單細(xì)胞的朝向和定向遷移
濾膜趨化實驗
實驗前需適當(dāng)選擇：①細(xì)胞培養(yǎng)皿(如Neuro Probe公司生產(chǎn)的盲孔
培養(yǎng)皿或多孔培養(yǎng)皿，也可選用帶有濾膜嵌套的24孔培養(yǎng)板)；②濾膜(
較厚的纖維素硝酸鹽或較薄的聚碳酸鹽)；③濾膜孔徑大��；④濾膜表
面包被(根據(jù)實驗細(xì)胞類型)。通過下列檢測使細(xì)胞遷移定量：①細(xì)胞遷
移入濾膜的距離；②貼于濾膜底面的細(xì)胞數(shù)；③穿經(jīng)濾膜和掉人下池的
細(xì)胞數(shù)。如果一種因子引起細(xì)胞遷移增強(qiáng)，需進(jìn)行其他實驗以確定是否
由隨機(jī)遷移(化學(xué)促進(jìn)作用)或向試劑定向運(yùn)動(趨化作用)，或兩種協(xié)同
作用引起的。將待測物注入濾膜的上方和下方，按一系列均一(各向同
性的)濃度檢測細(xì)胞遷移，以此可觀察化學(xué)促進(jìn)作用。
計算化學(xué)吸引系數(shù)和趨化系數(shù)。
因大多數(shù)化學(xué)吸引劑呈劑量依賴性刺激細(xì)胞運(yùn)動，故需仔細(xì)分析，
鑒別化學(xué)吸引劑刺激引起的運(yùn)動(化學(xué)促進(jìn)作用)和定向運(yùn)動(趨化作用)
。解決方法是，通過觀察同一部位化學(xué)吸引劑(摻入瓊脂糖)在不同濃度
情況下對于細(xì)胞遷移的作用，檢測化學(xué)吸引劑刺激引起的運(yùn)動。根據(jù)測
量數(shù)據(jù)可計算化學(xué)促進(jìn)系數(shù)，而化學(xué)促進(jìn)系數(shù)可用于評價化學(xué)促進(jìn)和趨
化作用對于細(xì)胞以化學(xué)吸引梯度形式遷移的相對作用。通過用錄像顯微
鏡觀察細(xì)胞遷移，可觀察到單細(xì)胞的朝向和定向遷移。對于已固定細(xì)胞
，有研究者以細(xì)胞核是否朝向確定細(xì)胞是否朝向化學(xué)吸引源。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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