標(biāo)題：簡易標(biāo)本制片技術(shù)簡介-石蠟切片的制作原理
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-4-12 15:13:12
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正文:
簡易標(biāo)本制片技術(shù)簡介-石蠟切片的制作原理
石蠟切片的制作原理是使加熱后呈液態(tài)的石蠟滲透到材料中，與細(xì)
胞組織融為一體，冷卻固化后，分割成小塊，在石蠟切片機(jī)上制作切片
。為此，有一套繁復(fù)的逐步置換程序：首先將固定的材料以不同濃度的
酒精(或其他溶劑)逐級脫水，至細(xì)胞中的水分完全被無水酒精置換；再
用能與酒精混合的溶劑如二甲苯逐步取代材料中所含酒精；最后用能溶
于二甲苯的石蠟逐步置換二甲苯；當(dāng)細(xì)胞完全被石蠟浸透后，冷卻，包
埋成蠟塊才能切片。粘貼在載玻片上的切片中充滿石蠟，既不能染色又
不能觀察，所以還必須用二甲苯逐步脫去石蠟，用酒精逐步脫去二甲苯
，再還原到水中，方可染色。染色后的切片，又要重復(fù)經(jīng)過脫水、脫酒
精的逐級程序達(dá)到二甲苯階段，然后以溶于二甲苯的樹膠封藏，才能置
于顯微鏡下觀察。你看這個(gè)程序包括：上行一下行一再上行往返多次的
倒騰，十分費(fèi)工費(fèi)時(shí)，從開始脫水到制成永久標(biāo)本，往往需數(shù)天之久，
而且一步不慎，前功盡棄。
為了簡化手續(xù)，研究者設(shè)計(jì)出一些簡易制片技術(shù)流程。一種常用的
方法是整體染色(wholestaining)，即材料先以適合的染料染色，再脫
水埋蠟。這樣制成的切片無需經(jīng)過下行一再上行的步驟，可以直接用二
甲苯脫蠟后封膠。整體染色的效果一般稍遜于切片染色，但在大規(guī)模研
究中可以大大減輕工作量，提高工作效率�？傊�，衡量一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的
價(jià)值標(biāo)準(zhǔn)，除精確性外還應(yīng)視其實(shí)用性；在許多場合下顯得不夠“高精
尖”的技術(shù)，在另一些場合可能用到實(shí)處，甚至成為不可代替的方法。
由于石蠟切片具有很大的優(yōu)點(diǎn)，所以雖然以后相繼發(fā)明了多種新的切片
技術(shù)，特別是適于制作更精細(xì)的半薄切片(semi—thin section)與超薄
切片(ultrathinsection)的超薄切片機(jī)，但它始終長盛不衰，至今仍在
眾多實(shí)驗(yàn)室中占有一席之地；甚至在現(xiàn)代RNA分子原位雜交研究工作中
，石蠟切片仍被廣泛應(yīng)用。不過石蠟切片有兩點(diǎn)最大的局限性：一是樣
品制備程序中采用的固定劑、包埋劑、刀具以及切片機(jī)運(yùn)行機(jī)制等環(huán)節(jié)
相對粗糙，影響精細(xì)的細(xì)胞學(xué)觀察；二是切片厚度受限制，一般難以突
破4～5μm的低限，而半薄切片厚度為0．3～2μm；超薄切片更薄至納
米級水平
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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