plaque assay詳細(xì)的步驟？顯微鏡百科！,顯微鏡,金相顯微鏡,生物顯微鏡

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正文:

plaque assay詳細(xì)的步驟？顯微鏡百科！

1.病毒以漢克緩沖液 (Hank's solution) 做十倍連續(xù)稀釋?zhuān)��?0-1稀釋至10-7。
2.把單層細(xì)胞的上清液吸掉后，加上病毒稀釋液0.05 ml，每一稀釋液接種二個(gè)洞(well)
  并放置在37 ℃溫箱一小時(shí)，其間每十五分鐘搖動(dòng)一次，使病毒可充分與細(xì)胞接觸。
3.二倍的Eagles液與二倍高級(jí)瓊脂等量溷合，即成一倍的工作液，(Eagles 培養(yǎng)液放在
  37 ℃水箱半小時(shí)) ，此時(shí)溫度約為41℃，每一洞內(nèi)加0.5ml。
4.放37 ℃溫箱培養(yǎng)，并含二氧化碳2.5 %。
5.48～96小時(shí)，顯微鏡觀察有CPE時(shí)，以10% 福馬林固定液一滴加于一個(gè)洞中，過(guò)夜。
6.固定后之微量盤(pán)置于水龍頭下，以水沖掉瓊脂，倒放，使水份流乾。
7.以1 % 結(jié)晶紫染液二滴染色一分鐘，再以自來(lái)水沖洗染液，直至無(wú)染料洗出為止。
8.自然乾燥后，便顯出無(wú)色的不規(guī)則空洞。