信息分類:生物-生命科學資訊
作者:yiyi發(fā)布
時間:2012-2-6 22:11:19
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正文:
一般細菌病害診斷及細菌鑒定采用的方法如下所述。
(一)革蘭氏染色(Gram staining):
將病組織中泌出的細菌或分離培養(yǎng)的細菌,固定于顯微鏡載玻片上,進行革蘭氏染色,細菌細胞呈藍色者為革蘭氏陽性細菌,呈紅色者為陰性細菌,成熟細胞則未被染色,有時陽性菌呈現(xiàn)紅色,通常都是死細胞。培養(yǎng)很久之陽性細菌,也會使染色反應(yīng)有變異或呈現(xiàn)陰性,若遇這種情形,應(yīng)再做另外之氫氧化鉀溶解度測定(KOH solubility test)和胺基勝酶活性測定
(aminopeptidase test)。
以3% KOH溶液和濃厚菌液用牙簽均勻攪拌,大約在5-10秒內(nèi),快速區(qū)分出植物病原細菌的革蘭反應(yīng),革蘭氏陰性細菌由于細胞壁易被氫氧化鉀溶液分解,釋放出脫氧核糖核酸(DNA),因而很快變黏稠;而陽性細菌則僅變混濁而分散在液滴中。
在胺基勝肰活性的測定中,因革蘭氏陽性細菌并不會產(chǎn)生對硝基苯胺(p-nitroaniline)所以無反應(yīng),但革蘭氏陰性伴隨對硝基苯胺之產(chǎn)生,而使菌落呈現(xiàn)黃色。
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