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信息分類(lèi):生物-生命科學(xué)資訊　　 作者:yiyi發(fā)布　　 時(shí)間:2012-6-17 1:04:03 將本頁(yè)加入收藏

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正文:

實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)：實(shí)驗(yàn)是從動(dòng)物的器官中分離細(xì)胞，將細(xì)胞染色于顯微鏡下觀察。

三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模豪�用PES將精子沖洗下來(lái)之后，于顯微鏡下觀察其型態(tài)。

四、實(shí)驗(yàn)原理：

1. 精子細(xì)胞為一個(gè)擁有半套染色體且具有泳動(dòng)能力的體內(nèi)細(xì)胞。精子于睪丸中形成之后，會(huì)進(jìn)行所謂的泳動(dòng)特性，此時(shí)它僅能移至儲(chǔ)存的位置副睪丸處。

2. 在成功受精過(guò)程中，精子們必須繼續(xù)往前游動(dòng)，當(dāng)精子進(jìn)入女性生殖道頸口時(shí)，精子的游動(dòng)速率會(huì)變的愈來(lái)愈慢。精子們能藉由排卵作用而重新獲得泳動(dòng)的能力，以便能達(dá)到輸卵管的上部位置并進(jìn)行與卵的受精作用。

3. 目前有多位科學(xué)家從事環(huán)境賀爾蒙、藥物及精子本身離子管道的研究，精子泳動(dòng)能力的針測(cè)是不可或缺的一個(gè)基本實(shí)驗(yàn)。

五、實(shí)驗(yàn)步驟：

將雞睪丸以RO水清洗表面，去除不必要的污水

以剪刀將雞睪丸剪開(kāi)，置于10公分組織培養(yǎng)皿上

以PBS來(lái)回沖洗剖面處，以利于精子的泳出

吸取含有精子的PBS溶液，以濾紙過(guò)濾

置于玻片上染色后觀察

六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

    本次觀察精睪丸中的精細(xì)胞主要有三種染色方式，分別為trypan blue染色法，；再者為以Liu’s stain染精細(xì)胞；最后為以Giemsa stain染精細(xì)胞。在trypan blue染色中可以看到精子游動(dòng)的情形。

七、結(jié)果討論：

    在精細(xì)胞經(jīng)過(guò)trypan blue的結(jié)果當(dāng)中，藍(lán)色的為死掉的精細(xì)胞，亮白色的為活的精細(xì)胞。在剛開(kāi)始的顯微鏡觀察中可以看到游動(dòng)的精細(xì)胞，且可以看到完整的鞭毛構(gòu)造。

    在圖三及圖四精細(xì)胞經(jīng)過(guò)Liu’s stain的結(jié)果中，可以看到藍(lán)紫色的核酸及鞭毛構(gòu)造。因?yàn)榧?xì)胞經(jīng)過(guò)高速離心的動(dòng)作，所以精細(xì)胞都已經(jīng)死亡，而且可以看到鞭毛已經(jīng)脫離了精細(xì)胞，但由圗中仍可以看到完整具有鞭毛的精細(xì)胞。

    圗五及圖六為精細(xì)胞經(jīng)過(guò)Giemsa stain染色后的結(jié)果圖。本次實(shí)驗(yàn)第一次用到Giemsa stain，細(xì)胞經(jīng)過(guò)顯微鏡觀察后可以看到細(xì)胞呈灰白色。由于Giemsa stain不需要將細(xì)胞離心處理，所以也可以看到很多完整具有鞭毛的精細(xì)胞。

八、實(shí)驗(yàn)心得：

    這是我們第一次利用動(dòng)物的器官進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并以染色的方式觀察其結(jié)果。在剛開(kāi)始的玻片觀察中可以看到精細(xì)胞游動(dòng)的樣子，但是之后因?yàn)榧?xì)胞處理的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，精細(xì)胞大部分都已經(jīng)失去其活性，所以在顯微鏡下看到的精細(xì)胞大部分都已經(jīng)不會(huì)動(dòng)。我覺(jué)得這對(duì)我們而言是一個(gè)很難得有趣的經(jīng)驗(yàn)。

出自http://www.xianweijing.org金相顯微鏡百科

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