信息分類:金相文章
作者:yiyi發(fā)布
時間:2011-12-3 12:20:15
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生物標(biāo)本之整體包埋法
介紹用整體包埋的方法處理較小或較平坦的標(biāo)本。各種種類的材料均可不經(jīng)切片予以完整的包埋,然常需要去掉一些多余的組織,或縮小切片使成為更合適的大小。一般在整體包埋時常被提到的材料是絲狀藻和菌類,藻類平坦的葉狀體,蕨類原葉體,纖細(xì)的蘚苔類植物,含有氣孔的葉片表皮,腺毛或腺體,蕨類的孢子囊,小花和花粉粒等。
整體包埋展現(xiàn)許多切片無法展現(xiàn)的特色且對某些器官的整體保存性比切片更好。
例如,在制備好的蕨類原葉體中,對藏精器和藏卵器的發(fā)育過程可更方便追蹤,比在切片中更容易顯現(xiàn)出來。再者,整體包埋更有意思的是它使最易碎的纖細(xì)植物得以永久保存,紅藻Antithamnion和Ceramium就是鮮明的例子。
諸多種類的標(biāo)本制備方法事實上就是整體包埋,但常被分類到其它方法名稱之下
例如花粉母細(xì)胞的抹片即是整體包埋,但是因為它們的目標(biāo)被定位為細(xì)胞學(xué)的研究,而不是一般形態(tài)上的目的,于是它們被分類在其它地方。
木材或莖的徒手切片也可算是一種整體包埋,但它們的處理方式是如此不同,以致于需另辟一類。
在不同過程的描述中,顯微鏡下不同類型的材料需用不同的染色方法將在各別的切片制作過程中敘述。
表皮永久包埋的過程
1. 取紫露草(Trandescantia sp., Zebrina, Wandering Jew)葉片使之凋萎1-2天之久。
2. 將葉背朝外使成弧形,以刀片淺橫切葉表皮后撕下表皮層,將長條狀之表皮層沉入水中,以避免組織卷曲。
3. 以純酒精固定條狀的表皮層10分鐘。
4. 每隔3分鐘依序放入不同百分比的酒精系列,95、85、70、50、30、10%然后再移到蒸餾水中。
5. 在1%Bismark Brown水溶液中染色3-5分鐘。
6. 在蒸餾水中淋洗。
7. 每隔3分鐘在不同百分比的酒精系列中脫水:10、30、50、70、85、95、100%。
8. 放入冬青油10分鐘。
9. 把條狀的表皮層切成每邊約3 mm小方塊。
10. 加一滴加拿大膠或Permount準(zhǔn)備封片,封片時盡可能小心保留一點冬青油。
11. 在顯微鏡下檢查,看看組織的外表層是否朝上。
12. 用干凈的蓋玻片封片,將玻片烘干,并除去多余的膠和貼上標(biāo)簽。
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