自動放射線顯影術
材料
準備下列的設備及材料:
a. 浸在水中黏有經(jīng)脫臘后的組織切片(組織經(jīng)切片后黏貼于載玻片, 經(jīng)脫臘及水化后浸于裝水的染缸中備用)。
b. 45℃的水浴鍋。
c. 裝置有柯達2號濾光片的暗室安全燈。
d. 兩個小燒杯和一個浸涂用玻璃杯(杯口約3.5公分,杯高約7公分)。
e. 干燥載玻片用的玻片架。
f. 紙巾。
g. 藥勺子。
h. 柯達NTB-3底片感光乳劑或Ilford底片感光乳劑。玻片涂裝感光乳劑
a. 在暗房里安裝水浴鍋、干燥載玻片用的架子等。
b. 關掉電燈,打開暗室安全燈,在小燒杯中裝滿3/4的感光乳劑再將小燒杯放在水浴鍋里,感光乳劑將在約10-20分鐘融化。成牛乳狀。
c. 感光乳劑融化之后,將它倒入浸涂玻璃杯(dipping vial),倒?jié)M約3/4杯高(約4公分深),然后在水浴中將它放進第二個燒杯。
使浸涂玻璃杯穩(wěn)定在水浴中間接加熱。
d. 將載玻片從浸泡的二次蒸餾水中移出,再將載玻片斜放在紙巾上以便將它弄干。
e. 每次一片,將載玻片未黏貼標簽之一端浸入裝著感光乳劑的浸涂玻璃杯中一下,浸入的深度約4公分。
浸涂后之玻片在玻璃杯邊緣短暫斜置以便去除過量的感光乳劑,然后將浸涂過的載玻片倒過來插進玻片干燥架中。
f. 讓載玻片風干約2小時-小心!它們不能曝光,將“暗室使用中請勿入內”標語貼在門上。
g. 把載玻片放在20片裝的黑色玻片儲存盒內,角落放置一小包干燥劑,在載玻片盒外四周用黑色膠帶纏繞和鋁箔包住以避光。
貼上標簽寫上你(妳)的名字、試驗批號和日期。
h. 浸泡2片額外的載玻片且貼上標簽寫上“測試載玻片”。
i. 把整盒玻片放在4℃下一星期,以使感光劑接受放射線源之曝光。
j. 在黑暗中取出一片測試的載玻片進行如底片沖洗一樣的步驟。(例如,D-19顯影劑以水(1:3)稀釋,5分鐘;停止顯影液2分鐘;
固定液5分鐘;水沖洗10分鐘)
k. 將載玻片放在0.1%甲苯胺藍溶液(Toludine blue)中染色約一分鐘。以水沖洗載玻片直到感光乳劑上的甲苯胺藍染劑被去除。根部組織應呈暗藍色。 若為壓平標本或細胞抹片則無必要用甲苯胺藍染色。
l. 將載玻片進行脫水并以蓋玻片封片。
m. 體視
生物顯微鏡檢視玻片標本中的細胞核是否有銀的黑色粒子出現(xiàn)。若曝光時間足夠則會有為數(shù)甚多的銀粒子沈淀。此時即可將所余經(jīng)曝過光的玻片全部顯影沖洗。
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