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葉片透化法(1)北京金相顯微鏡版權(quán)
（I）葉片透化
1. 用熱酒精間接加熱去除葉綠素（新鮮的葉子）；把材料放入水中煮直到葉片沉下去。
2. 把葉片移到裝有5％或2％NaOH的燒杯中以去除葉肉。
3. 放入烤箱中一或幾天；時(shí)常更新試劑；當(dāng)葉子不再變色時(shí)即停止清除并徐緩地用蒸餾水清洗幾次；假如材料上枝葉肉不能完全清除，可使用以下溶液：100㏄.蒸餾水中放入250克choral hydrate。把材料放入上述溶液后置于烤箱（50-100℃）里并常常檢查。就如上述的清洗。
4. 把已清洗干凈的材料儲(chǔ)藏于50％酒精里或進(jìn)行下一個(gè)步驟。
5. 在酒精系列中脫水并用二甲苯在Syracus表玻璃中清洗，亦可在一般的容器中進(jìn)行脫水：50％的酒精、0.5％safranin、95％的酒精、100％酒精（2次）、100％ alcohol-xylene（1：1）、100％alcohol-xylene（1：1）、二甲苯，用Harleco包埋。
6. 如果有需要時(shí)，把重物壓在蓋玻片上，直到封膠干燥再移去。
7. 注意：處理材料可使用毛筆或用小紙片舉起或用解剖刀。不要用鑷子夾材料。
    （II）葉片的清洗和染色步驟
    1. 浸泡在熱水和“Aerosol OT ”（3％soln.）中一小時(shí)，直到葉子軟化。
    2. NaOH（5％）在42℃下或溫度更高的爐子里隔夜。
    3. 用2.5％醋酸沖洗，之后用水洗三次。
    4. 用1：1chloralhydrate和30％H2O2洗凈葉子-----大約在50-100℃的爐子里5分鐘。
    5. 用水至少?zèng)_洗3次。
    6. 50％酒精-----10分鐘
    7. 0.5％ Safranin溶在50%的酒精里-----隔夜
    8. 用50％ EtOH沖洗。
    9. 70％ EtOH-----15分鐘
    10. 95％ EtOH-----10分鐘
    11. 純酒精-----15分鐘
    12. 重復(fù)步驟11
    13. 1：1的酒精和二甲苯-----15分鐘
    14. 二甲苯-----15分鐘
    15. 包埋。

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