木材纖維解離法木質(zhì)材料軟化的技術(shù)
木質(zhì)材料軟化的技術(shù)
過去許多研究學(xué)者使用Jeffrey的軟化技術(shù), 用等量10%硝酸和10%鉻酸浸泡材料。進行此方法時因所需時間常常無法掌握而使結(jié)果無法穩(wěn)定。以下是描述有關(guān)使用”superoxal”和冰醋酸當(dāng)作浸離溶液和使用膠封片的方法。
浸離之材料:
a)葡萄莖的木質(zhì)部,b)裸子植物的木質(zhì)部,c)亞麻的莖
過程
1. 將木質(zhì)部樣品切成粗約火柴棒的大。s一公分長),并投入下列浸離之溶液中,溶液置于有瓶蓋之玻璃瓶內(nèi):
1份superoxal(30%的H2O2水溶液),即未經(jīng)稀釋的雙氧水
4份蒸餾水
5份冰醋酸
2. 將玻璃瓶放入約56℃的烘箱中三天。塞緊。
3. 如果材料已經(jīng)完全軟化(然而材料外觀也許仍然完整),溶液將呈清澈狀,材料會變白或半透明狀,若材料未變半透明狀,則需重復(fù)下面的步驟。
4. 將溶液倒掉,加入新鮮的浸離溶液,讓其持續(xù)作用24到48小時。
5. 當(dāng)浸離完成,用水洗三次,每次更換水的時間隔數(shù)小時,最后要用水浸泡過夜,并保存于濃度50%的酒精中備用或立即進行下一個步驟。
6. 以解剖刀挑取一小團細胞(只需不到10根纖維即可)放在干凈的載玻片上。
7. 用玻璃滴管滴1%的safranin,蓋過材料即可,讓其染色5-10分鐘。
8. 讓safranin由載玻片之一端溢出,再用玻璃滴管由載玻片之另一端滴入濃度95%的酒精,并且更換濃度95%的酒精3或4次,再將酒精去掉。
9. 用上述的方法更換濃度100%的酒精4次,再去掉酒精。
10. 用二甲苯溶液洗材料兩次,并用解剖針輕輕地將材料展開。
11. 滴一滴封膠在材料上并以蓋載玻片封片用于
解剖顯微鏡觀看。
12. 貼上標(biāo)簽。
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