信息分類:金相文章
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2011-11-5 19:41:44
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培養(yǎng)細(xì)胞最重要是?選擇合適的培養(yǎng)基和恒溫箱等基本設(shè)備
實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備
所以培養(yǎng)生物顯微鏡下細(xì)胞最重要的是選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基(medium)和恒溫箱。目前實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的生物顯微鏡下細(xì)胞系都有其特定的培養(yǎng)基以及培養(yǎng)環(huán)境。一般的培養(yǎng)箱溫度都維持在37℃,所輸入的空氣中二氧化碳的量隨生物顯微鏡下細(xì)胞系的不同而有差異,一般是在2~5%左右。
觀察生物顯微鏡下細(xì)胞活動(dòng)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果最重要的工具是顯微鏡;顯微鏡可分為直立式(一般)顯微鏡和倒立式顯微鏡。生物顯微鏡下細(xì)胞在培養(yǎng)皿內(nèi)的生長活動(dòng)情形,必須以倒立式顯微鏡觀察。因?yàn)橐话阒绷⑹斤@微鏡的物鏡與載物臺(tái)間的距離,無法容納培養(yǎng)皿的高度,才發(fā)展出倒立式顯微鏡。兩者之差異是直立式的目鏡在物鏡之下,而倒立式顯微鏡剛好相反。觀察計(jì)算生物顯微鏡下細(xì)胞染色體數(shù)目時(shí),必須將生物顯微鏡下細(xì)胞染色封片,而在直立式顯微鏡上觀察。
精確計(jì)算生物顯微鏡下細(xì)胞數(shù)目,在實(shí)驗(yàn)上是相當(dāng)重要的,尤其在計(jì)算種植率或生物顯微鏡下細(xì)胞存活率時(shí),更形重要。通常,要確定生物顯微鏡下細(xì)胞數(shù)目必須利用生物顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)器,計(jì)數(shù)器可分為人工和機(jī)械式兩種;血球計(jì)數(shù)器是屬于人工式計(jì)數(shù)器,將生物顯微鏡下細(xì)胞溶液滴在計(jì)數(shù)板上,再置于顯微鏡下計(jì)算。機(jī)械式是將生物顯微鏡下細(xì)胞溶液置于電子計(jì)數(shù)器下,利用生物顯微鏡下細(xì)胞撞擊電極而計(jì)數(shù)的方法。二者各有利弊,一般皆採兩者并用而互相驗(yàn)證。
生物顯微鏡下細(xì)胞培養(yǎng)器具,可分為玻璃瓶和可棄式塑膠瓶。例行培養(yǎng)大都以玻璃瓶,實(shí)驗(yàn)測(cè)試時(shí)才用可棄式塑膠瓶。生物顯微鏡下細(xì)胞所需的培養(yǎng)基及其他添加物,都必須冷藏,所以冰箱和凍箱是實(shí)驗(yàn)室必備的。而實(shí)驗(yàn)器具和培養(yǎng)基都要求是無菌的,故消毒器也是不可或缺。器具的消毒是以高溫高壓滅菌器進(jìn)行,培養(yǎng)基則是以過濾紙除菌。
綜括以上所述,生物顯微鏡下細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備至少需要七項(xiàng):培養(yǎng)基、恒溫箱、顯微鏡、生物顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)器、培養(yǎng)器具、冷藏設(shè)備(冰箱、凍箱)及消毒滅菌器。
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