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正文:

洋桔梗壞疽病毒 (Lisianthus necrosis viru s, LNV) 為晚近在中部地區(qū)洋桔梗上新發(fā)現(xiàn)及鑑定之球形
病毒。本試驗(yàn)利用光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡及三種血清學(xué)技術(shù)，探討以其偵測及診斷 L N V 之可行
性。利用橙綠蛋白質(zhì)染劑 (Calcomine orange-Luxol brilliant green BL) 染色罹病洋桔梗葉片表皮，以光
學(xué)顯微鏡可觀察到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有不規(guī)則束狀類似內(nèi)含體之構(gòu)造。醋酸鈾 (uranyl acetate) 溶液陰染罹病
葉片粗汁液或純化懸浮液于電子顯微鏡下，可觀察到直徑約 3 2 n m 之球形病毒；超薄切片罹病葉片及
花瓣于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可觀察到類似之病毒顆粒或病毒聚集之情形。以 L N V 兔子抗血清及老鼠單元抗體進(jìn)
行西方轉(zhuǎn)漬反應(yīng) ( Western blot) 可偵測到單一鞘蛋白基本單位 (coat protein subunit)，分子量約為 3 8
k D a。相同之抗血清進(jìn)行間接酵素連結(jié)免疫分析 (indirect ELISA) 或三層酵素連結(jié)免疫分析 ( TA S
E L I S A )，L N V 罹病植物組織粗汁液全抗原之最終稀釋倍數(shù)為 1 0-4 或 1 0- 5。于 2 6℃， L N V 罹病葉粗汁
液機(jī)械接種于洋桔梗幼苗，以直接組織轉(zhuǎn)漬法 (direct tissue blot, DTB) 于接種后 1 2 小時(shí)即能偵測到新
複製之 L N V 抗原，而 indirect ELISA 則于接種后 4 8 小時(shí)始能偵測之，顯然以 D T B 偵測新複製之 L N V
抗原的時(shí)間較 indirect ELISA 為早。
關(guān)鍵詞：洋桔梗壞疽病毒、診斷方法

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科