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正文:
細胞懸液純度
細胞分選型流式細胞儀應與細胞分析型區(qū)別對待。從電子學的角度
來看,雖然分選型流式細胞儀更為復雜,但其主要功能是為制備分選細
胞而設計的,因而不可在敏感性和分辨率角度方面過高要求此型儀器。
細胞分選過程中,選用的細胞懸液純度好壞會直接影響分辨率的指
標。上述所有方法均可用于細胞分選。然而需要注意的是,可用活細胞
分選的卻只有幾項。這方面尚需進一步研究探索,以求發(fā)展。細胞分選
中更應論及的是技術局限性,首先,含分選細胞的液滴的間隔超過鞘液
中空液滴的15倍,這意味著細胞將大大地被稀釋。正常情況下需將細胞
進一步濃縮,造成不可避免的丟失。
加快細胞分析速度將大大降低制備所得樣品的純度。廠家提供的噴
嘴流速被以為是獲取良好制備結果的最佳選擇,這一公認流速不超過50
00個細胞/秒。一般認為小于2000細胞/秒的流速更為有效。這一速度
適用于所有能流經(jīng)噴孔的細胞。分選細胞的實際回收率取決于待分細胞
與待除去細胞之間的比例關系,因為計算機也一直在處理確切的細胞信
息。實際上,低頻率含細胞液滴1:15可避免上述問題。在統(tǒng)計學上降
低細胞鞘液同時包括兩個細胞的機率。
分選一種細胞使其達到所要數(shù)目,則要求分選周期加長,這無形中
增加下列潛在危險:細胞溶解碎片增多,細胞團聚,異物生成而堵塞噴
嘴,甚至導致噴孔流速改變。而這正是造成細胞流失及純度下降的最重
要的原因。
上述方法學的所有過失都是根據(jù)我們的經(jīng)驗總結出的。流式細胞分
析技術和細胞分選技術正以它的先進性而被越來越多的科學家所認識。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科