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正文:
測(cè)定組織細(xì)胞質(zhì)壁分離微
生物分析
顯微鏡
液泡體積增加很大,致使原生質(zhì)膜完全被鑲襯在細(xì)胞壁內(nèi)表面上,因
而又達(dá)到了初始質(zhì)壁分離狀態(tài)。在達(dá)到初始質(zhì)壁分離的時(shí)候,滲透物質(zhì)的
部分濃度依然小于外部溶液濃度(c),這時(shí)滲透物質(zhì)的濃度平衡尚未達(dá)到,
因而溶質(zhì)繼續(xù)向液泡滲入。隨后導(dǎo)致液泡體積的進(jìn)一步增大,并將觸及到
細(xì)胞壁,這樣又逐漸形成了壁內(nèi)壓。液泡吸收水分的量將不再與滲透溶質(zhì)
的量相對(duì)應(yīng),而是大大減少,因此,一個(gè)附加的吸水勢(shì)形成,這個(gè)附加吸
水勢(shì)與細(xì)胞壁彈性伸張力導(dǎo)致的壁壓相平衡。 實(shí)驗(yàn)方法可以對(duì)細(xì)胞透
性作相對(duì)
測(cè)量,而且當(dāng)用一些更先進(jìn)的計(jì)算方法時(shí),可以推算出組織絕對(duì)
透性常數(shù)的近似值。
此方法的優(yōu)點(diǎn)是,它可用于任何形狀的細(xì)胞而不必是形狀規(guī)則的細(xì)胞
。因此,此方法可以用于大多數(shù)組織。然而,廣泛應(yīng)用此法需要滲透值和
膜透性高度一致的大量細(xì)胞。在大多數(shù)情況下,可用組織很難提供足夠多
的、均一的切段,使得此方法的應(yīng)用受到限制。適合此方法的一種實(shí)驗(yàn)材
料是Rhoeo discolor的葉中脈的下表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)的基本思想是測(cè)定組織細(xì)胞質(zhì)壁分離發(fā)生的頻率,并從這些數(shù)值
推算出在給定的時(shí)問(wèn)內(nèi)滲透到液泡內(nèi)的物質(zhì)的濃度,各種程度的質(zhì)壁分離
,如初始質(zhì)壁分離均包括在內(nèi)。
為了準(zhǔn)備測(cè)定透性,要備有一組濃度梯度的高滲溶液。每一種溶液濃
度放在一個(gè)小玻璃瓶中,將每個(gè)切段在固定的時(shí)間間隔內(nèi)依次放入每個(gè)濃
度溶液中。此時(shí)間間隔應(yīng)足夠長(zhǎng)(5~10分鐘),以便對(duì)每個(gè)切段進(jìn)行鏡檢。
每個(gè)切段在一溶液中經(jīng)過(guò)一段恒定的時(shí)問(wèn)間隔(15---,30分鐘為宜)之
后,將它浸入載玻片上的一滴該溶液中進(jìn)行鏡檢。通過(guò)顯微測(cè)量法測(cè)定發(fā)
生質(zhì)壁分離的細(xì)胞數(shù)以估算其頻率。鏡檢后,該切段仍要放回原溶液中。
為了比較質(zhì)壁分離發(fā)生的頻率
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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